基于Click反应和EdU掺入的真正的细胞增殖检测!
荧光或显色成像、流式或比色分析任您选择!
还在用MTT、WST-1、CCK-8这样的间接方法检测细胞增殖吗?
还在用放射性的[3H]thymidine掺入直接检测细胞增殖吗?
聪明的您或许已经在使用BrdU掺入法直接检测细胞增殖了!
碧云天给您带来BrdU法的升级版最新方法,
基于Click反应的EdU掺入法(参考图1)!
碧云天精心研制的BeyoClick™系列细胞增殖检测试剂盒,
包括Alexa Fluor 488/555/594/647共四种荧光检测试剂盒,
以及明场检测的DAB法和比色检测的TMB法!
绚丽的荧光检测照片,
精准的流式定量检测,
便捷的明场DAB显色,
直观的TMB显色定量,
尽在BeyoClick系列产品!
图1. BeyoClick™ EdU检测法中的点击反应(Click reaction)原理图。荧光探针等标记的叠氮化物(Labeled Azide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,最终使细胞DNA标记上荧光探针或其它探针。
BrdU法必须使用BrdU抗体。由于空间位阻,双链DNA须变性后才能使BrdU抗体与BrdU结合。而EdU法无需使用抗体,无需DNA变性,操作更便捷,兼容性好,检测结果更加稳定可靠(参考图2)。
图2. BrdU法和BeyoClick™ EdU法检测原理的比较。A. BrdU法需使用大分子的BrdU抗体,由于空间位阻,双链DNA须变性后才能使BrdU抗体与BrdU结合。B. EdU法使用小分子标记的叠氮化物(Azide),无需DNA变性,操作更便捷,兼容性好,检测结果更加稳定可靠。
BeyoClick™系列产品的检测效果请参考图3-8。
图3. HeLa细胞用BeyoClick™ EdU-488细胞增殖检测试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到绿色荧光(最左侧一列);EdU (10μM)组有明亮的绿色荧光(中间一列);而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后,绿色荧光显著减弱,说明DNA合成抑制后,EdU的掺入被显著抑制(最右侧一列)。
图4. Jurkat细胞用BeyoClick™ EdU-488细胞增殖检测试剂盒标记后用流式细胞仪检测细胞增殖的效果图。Jurkat细胞只用EdU标记(左图),或在标记的同时用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右图),2小时后用本试剂盒进行点击反应,然后用流式细胞仪进行检测。
图5. HeLa细胞用BeyoClick™ EdU-555细胞增殖检测试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到红色荧光(最左侧一列);EdU (10μM)组有明亮的红色荧光(中间一列);而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后,红色荧光显著减弱,说明DNA合成抑制后,EdU的掺入被显著抑制(最右侧一列)。
图6. Jurkat细胞用BeyoClick™ EdU-555细胞增殖检测试剂盒标记后用流式细胞仪检测细胞增殖的效果图。Jurkat细胞只用EdU标记(左图),或在标记的同时用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)处理(右图),2小时后用本试剂盒进行点击反应,然后用流式细胞仪进行检测。
图7. HeLa细胞用BeyoClick™ EdU细胞增殖检测试剂盒(DAB法)检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到棕色染色(最左侧一列);EdU (10μM)组有明显的棕色染色(中间一列);而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后,棕色染色显著减弱,说明DNA合成被抑制后,EdU的掺入被显著抑制(最右侧一列)。
图8. HeLa细胞使用本试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组(阴性对照组)呈现较低的吸光度;EdU (10μM)组(阳性组)吸光度较高;而用DNA合成抑制剂Hydroxyurea (10mM)提前预处理0.5小时(抑制剂组)后,吸光值显著降低,几乎和阴性对照组一致,说明DNA合成被抑制后,EdU的掺入被显著抑制。
细胞增殖和细胞毒性检测的产品辣么多,究竟该选择哪一个?请参考碧云天各种细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择:http://www.beyotime.com/support/cell-proliferation.htm。
附产品订购信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 价格 |
C0071S | BeyoClick™ EdU-488细胞增殖检测试剂盒 | 50-500次 | 618.00元 |
C0071L | BeyoClick™ EdU-488细胞增殖检测试剂盒 | 200-2000次 | 1956.00元 |
C0075S | BeyoClick™ EdU-555细胞增殖检测试剂盒 | 50-500次 | 618.00元 |
C0075L | BeyoClick™ EdU-555细胞增殖检测试剂盒 | 200-2000次 | 1956.00元 |
C0078S | BeyoClick™ EdU-594细胞增殖检测试剂盒 | 50-500次 | 618.00元 |
C0078L | BeyoClick™ EdU-594细胞增殖检测试剂盒 | 200-2000次 | 1956.00元 |
C0081S | BeyoClick™ EdU-647细胞增殖检测试剂盒 | 50-500次 | 618.00元 |
C0081L | BeyoClick™ EdU-647细胞增殖检测试剂盒 | 200-2000次 | 1956.00元 |
C0085S | BeyoClick™ EdU细胞增殖检测试剂盒(DAB法) | 50-500次 | 618.00元 |
C0085L | BeyoClick™ EdU细胞增殖检测试剂盒(DAB法) | 200-2000次 | 1956.00元 |
C0088S | BeyoClick™ EdU细胞增殖检测试剂盒(TMB法) | 500次 | 618.00元 |
C0088L | BeyoClick™ EdU细胞增殖检测试剂盒(TMB法) | 2000次 | 1956.00元 |
S1961-10mM | Hydroxyurea (DNA Synthesis抑制剂) | 10mM×1ml | 58.00元 |
S1961-200mg | Hydroxyurea (DNA Synthesis抑制剂) | 200mg | 61.00元 |
S1961-1g | Hydroxyurea (DNA Synthesis抑制剂) | 1g | 161.00元 |
S1961-5g | Hydroxyurea (DNA Synthesis抑制剂) | 5g | 452.00元 |
ST067-50mg | EdU | 50mg | 326.00元 |
ST067-250mg | EdU | 250mg | 1218.00元 |
ST067-1g | EdU | 1g | 3792.00元 |