超高性价比!实验室必备高颜值、高性能产品!
科研道路千万条,电泳实验第一条;师兄仪器没选好,师妹实验两行泪!
无论是大师兄、大师姐,还是二师兄、二师姐,
制胶、电泳、转膜仪器设备,选择碧云天就可以每天当个好师兄、好师姐了!
蛋白、核酸,电泳、转膜分分钟搞定;快发paper、招揽小师弟小师妹的必备利器!
配胶的时候胶漏了?本想一次配4块,却有1块漏得没法用,又要重来一遍?
跑胶的时候胶歪了?蛋白电泳的时候越跑越歪,结果发现是内槽电泳液一直在漏?
转膜的时候膜花了?有些地方转上了,有些地方居然marker都没转过去?
电泳、转膜的时候电源不给力?报错超载了?
选择碧云天的仪器设备,这些问题统统解决!!!
还记得我们之前提出的小问题:论如何以正确的姿势完成电泳?
您的每一步碧云天都已经为您准备好最好用,最可靠,最方便的试剂;
用了最合适的试剂,做了最认真的实验,却因为渣渣仪器的问题失败了?
我们和您一样在意!
轰轰轰,今天可以郑重地向大家介绍推荐
碧云天全新的制胶、电泳和转膜仪器设备:
MiniProGel™蛋白制胶与电泳系统
MiniBlot™蛋白转膜系统
NA-Gel™核酸电泳系统
BeyoPower™ 中电流电源(300V/600mA/100W)
BeyoPower™ 高电流电源(300V/2000mA/200W)
以及各种配套组件,应有尽有!
为蛋白和核酸的电泳和转膜提供了完整的仪器设备解决方案!
碧云天更有蛋白和核酸电泳转膜的全系列试剂提供!
转移电极芯组件具有4cm长的电极距离,可产生较高电场确保蛋白转印效率
核酸电泳系统采用了多重安全设计,安全盖移位栓设计,确保安全方便
配套的电泳仪电源稳定性好、可靠性强、效率高、重量轻、产热量小
同时具有断电保护功能,断电时自动存储已运行时间及条件,来电后自动继续运行
即使是中电流电源最大电流都达到了600mA,完全满足常规转膜需要
高电流电源的输出电流最高为2000mA,可满足2-3个电泳槽同时转膜的需要
所有仪器和配件完全兼容伯乐(Bio-Rad)公司的电泳仪器及其配件!
相信你可能在我们预制胶视频中已经一睹部分产品的风采,
如此好用又颜值在线的产品价格呢?
绝对的高性价比之王
大部分产品只有某国外知名公司1/3左右的价格
部分配件甚至不到1/10,
赶紧来购买吧
不管您是新建实验室要配套基本仪器,
还是实验室扩大要再增加几套
又或是想换一些新配件
相信都能找到您满意的产品!
此外我们也为您精心准备了常见实验问题解决方法,希望能帮助您得到完美的电泳结果!
附:常见问题解决方法:
蛋白电泳常见问题:
问题 | 原因 | 解决方案 |
“微笑现象”:凝胶两端条带向上弯曲 | 胶板中央温度高于两端 | 缓冲液没有混合均匀或内槽中的缓冲液太浓,重新配制缓冲液,确保混合均匀,特别是当稀释5X或10X储存液时 |
电泳功率太大导致发热 | 适当降低电泳电压,或将外槽缓冲液添加至短玻璃板上沿以下1cm之内,或把电泳槽放置在冰浴或4ºC冷库进行电泳。 | |
蛋白条带拖尾 | 样品过量 | 减少上样量 |
细胞过多造成裂解不充分,基因组DNA导致样品粘稠 | 适当稀释样品并煮沸变性,也可超声处理,离心后取上清上样 | |
组织样品 | 组织样品很容易出现拖尾现象,可能是组织样品高速匀浆或超声不足,请再适当高速匀浆或超声处理后高速离心取上清 | |
样品有沉淀 | 上样前对样品进行离心,取上清用于上样 | |
条带横向散布 | 电泳未开始前样品已扩散 | 尽量减少从上样到开始电泳的时间 |
样品离子强度低于凝胶 | 使用与分离胶或浓缩胶相同离子强度的上样缓冲液 | |
条带扭曲或歪斜 | 凝胶聚合失败 | 适当增加过硫酸铵和TEMED的用量 |
样品含有高浓度盐分 | 透析除盐或用脱盐柱除盐 | |
浓缩胶或分离胶顶面不平整 | 确保梳子底面平整,并等凝胶凝固充分后小心取出梳子;制胶时,均匀并小心滴加去离子水覆盖分离胶表面 | |
泳道在胶底部收缩 | 样品离子浓度高于周围凝胶 | 将高盐样品进行脱盐处理 |
电泳时间明显延长 | 电泳缓冲液过浓 | 检查电泳缓冲液配方 |
样品盐分过多 | 样品脱盐 | |
电泳时蛋白跑得太快 | 电泳缓冲液浓度过低 | 检查电泳缓冲液配方 |
电压设定过高 | 适当降低电泳电压 | |
应该是单一蛋白却出现两条带 | 该蛋白的一部分可能在电泳过程中被再次氧化;或在电泳前没有被充分还原,重新配制上样缓冲液 | 增加上样缓冲液中DTT的浓度,或把DTT换成2-巯基乙醇。 |
蛋白出现磷酸化等修饰或降解 | 重新抽提蛋白,使用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂等 | |
条带比预期的少,且染料前沿有很重的带 | 蛋白质迁移到染料前沿 | 增加分离胶浓度或考虑适当缩短电泳时间 |
蛋白降解 | 使用蛋白酶抑制剂并在样品抽提过程中尽量低温操作 | |
内槽漏液 | 内槽液体过满 | 保持内槽液面在带边条玻璃板上沿略下 |
组装不合适 | 保证绿色U型密封圈干净无缺口,保证短玻璃板在绿色U型密封圈的缺口之下而不是之上 | |
手工灌胶时漏液 | 玻璃板有缺口 | 确保玻璃板完整无缺口 |
带边条玻璃板、短玻璃板没有水平 | 确保玻璃板排列平整,清洗制胶架密封垫 | |
制胶架密封垫有裂纹或磨损 | 更换破损的制胶架密封垫 | |
胶孔底部成型差 | 过硫酸铵和TEMED用量有问题 | 配制新鲜的过硫酸铵,在浓缩胶配制时适当增加过硫酸铵和TEMED的用量 |
夹胶框的压力凸轮很难闭合 或有噪音 |
压力凸轮的枢轴有粉末残留 | 在每次使用前清洗或擦去粉末残留物 |
转膜常见问题
问题 | 原因 | 解决方案 |
蛋白转移效果差 | 转移时间太短 | 增加转移时间。 |
转移功率太低 | 重新配制转膜液或提高电流、使用高电流电源,或延长时间。 | |
转移设备装配不正确,蛋白移动向错误 方向 |
凝胶与印迹膜的三明治组合顺序错误,或者三明治夹在电源槽中的插入方向相反,检查与电源连接的极性;使用预染蛋白marker确定转膜效果。 | |
荷质比不正确 | 接近蛋白等电点的转膜液pH值会使转移失败,一般建议转膜液的pH值应低于或高于待检测蛋白的等电点2个pH来增加转移效率,可以尝试更酸或更碱的转膜液以增加蛋白的迁移率。 | |
蛋白在凝胶中沉淀 | 尝试在转膜液中加入SDS。SDS可以提高转移效率,但同时也会使蛋白与硝酸纤维素膜的结合率降低,并影响某些蛋白与抗体的反应;过量的甲醇或乙醇也可能导致蛋白沉淀,可适当降低甲醇或乙醇的含量。 | |
凝胶浓度太高 | 降低凝胶浓度可增加凝胶孔径,从而提高转移 效率。 |
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核酸转移效果差 | 凝胶浓度太高 | 使用低百分比浓度聚丙烯酰胺凝胶或琼脂糖凝胶;转移电泳之前用0.25M稀盐酸切割DNA或用稀NaOH切割RNA。 |
转移时间太短或转移功率太低 | 增加转移时间或者使用高电流转移。 | |
DNA或RNA不能被电泳转移到硝酸纤维素膜上,因为与该膜结合所需盐浓度太高 | 使用带正电荷的尼龙膜替换硝酸纤维素膜。 | |
条带扭曲或丢失;扩散转移 | 印迹膜与凝胶接触不良,可能在印迹膜与凝胶之间存在气泡或多余的转膜液 | 使用赶气泡滚子在印迹膜表面向不同方向小心滚动,直至印迹膜与凝胶之间的气泡和多余的转膜液被完全排出,即做到印迹膜与凝胶的完全接触;在凝胶/印迹膜的三明治中使用厚一些的滤纸或多层滤纸;长时间的挤压会使转移衬垫变薄,不能有效地压紧印迹膜和凝胶,可以更换新的转移衬垫。 |
电流或电压太高 | 转移开始时即检查电流,更改电流或电压设置,或者重新配制转膜液。 | |
印迹膜没有完全浸湿或者已干燥 | 硝酸纤维素膜须用转膜液完全浸润平衡,而常规PVDF是疏水的,必须先用甲醇等或专用的PVDF膜浸润活化液完全浸润后再用转膜液平衡。如果转膜操作时印迹膜已经干燥,需要重新浸润。 | |
转膜过程中可能存在错误 | 转膜的不正也常可能由于凝胶聚合不好、不合适的转膜条件、被污染的转膜液、样品过载等因素引起。 | |
转移三明治夹图案被转移到印迹膜上 | 使用了被污染的或者太薄的转移衬垫 | 更换衬垫或彻底清洗被污染的衬垫。 |
凝胶上有过多的大量蛋白,或者转膜液中使用了太多SDS;蛋白质可以穿透印迹膜,不与印迹膜结合,并且游离在转移电泳槽中。 | 缩短转膜时间;减少电泳时的蛋白上样量,减少转膜液中的SDS。 | |
转膜液被污染了 | 重新配制转膜液,避免使用用过的转膜液。 | |
与印迹膜的结合失败—— 硝酸纤维素膜 |
硝酸纤维素膜需要在20%的甲醇或乙醇的转膜液中来优化与蛋白质的结合 | 确认转膜液中含有合适量的甲醇或乙醇。 |
蛋白质可能透过了硝酸纤维素膜 | 使用PVDF或尼龙(高结合容量)膜,或者使用较小孔径的硝酸纤维素膜 (如0.2μm);如果使用了大功率转移条件,改为较低功率的转移条件,或者适当缩短转移时间。 | |
混合的酯纤维素与蛋白质结合差 | 使用纯硝酸纤维素膜。 | |
<15,000Da的蛋白质表现出与0.45μm硝酸纤维素膜的结合力降低,或者在分析过程中被冲洗掉 | 为增强结合的稳定性,蛋白质可以用戊二醛交联到硝酸纤维素膜上;使用具有更高结合容量的PVDF或尼龙膜;在洗涤和抗体孵育步骤中使用Tween 20作去垢剂,减少或去除强清洗条件。 | |
转膜液中的SDS会降低蛋白的结合效率 | 减少或去除转膜液中的SDS。 | |
印迹膜可能没有被完全浸润 | 硝酸纤维素膜上的白色斑点是蛋白质不能结合的干燥区域。如果将印迹膜沉浸在缓冲液中不能立即浸湿,可以加热蒸馏水至沸点以下,将印迹膜全部浸泡,再以转膜液平衡后即可使用。 | |
与印迹膜的结合失败—— PVDF膜 |
印迹膜没有被完全浸湿 | 因为PVDF的疏水特性,PVDF膜在以水性转膜液平衡之前必须先用甲醇或乙醇完全浸润。 |
操作过程中膜已经干燥 | 完全浸湿的膜具有灰色、半透明的外观。膜上的白色斑点处是干燥的没有被浸润的地方。由于蛋白质不会与干躁的印迹膜结合,请重新用甲醇或乙醇湿润膜,并重新以转膜液平衡。 |
核酸电泳常见问题
问题 | 原因 | 解决方案 |
泳道或条带倾斜 | 凝胶没有充分凝固 | 至少放置20-40分钟使琼脂糖凝胶凝固充分 |
凝胶在凝胶平台上没有放正 | 检测制胶托盘或凝胶的位置,要求平行放正 | |
梳子弯曲或倾斜 | 检查制胶梳子的摆放 | |
泳道或条带呈曲线或扭曲 | 样品孔中有气泡 | 配制琼脂糖凝胶时去除气泡 |
相对迁移率有差异 | 样品从样品孔溢出 | 使用合适的DNA上样缓冲液或减少样品上样量并小心上样 |
电泳装置不水平 | 在稳固、水平的桌面上进行电泳 | |
条带弯曲、微笑 | 样品过载 | 减少样品上样量 |
样品孔不成型 | 拔取梳子时需小心,尤其是对较软的低浓度胶。让凝胶充分冷却有助于梳子的拔取 | |
条带拖尾、模糊或产生条纹 | 琼脂糖的内渗透不适合 | 更换成合适的琼脂糖 |
样品中的盐分太高 | 减少盐浓度至≤0.1M | |
电压太高并且产热较多 | 降低电压 | |
样品溢出到样品孔外 | 小心加样或加厚凝胶或使用宽厚梳齿以增大样品孔上样量 | |
消化不完全或有核酸酶污染而降解 | 检查酶活性,进一步消化样品或重新提取样品 | |
样品孔穿透凝胶,样品在凝胶底部漏出 | 制胶梳子必须比凝胶底部表面高出1-2mm | |
样品浓度过高 | 适当稀释样品 | |
电泳缓冲液使用次数过多 | 电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值降低,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。须经常更换电泳缓冲液 | |
有蛋白污染 | 提高DNA的抽提质量或电泳前用苯酚抽提去除 蛋白 |
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条带很锐利但一些条带观察不到 | 琼脂糖凝胶浓度太高 | 降低琼脂糖浓度 |
不完全消化 | 检查酶活性,进一步消化样品 | |
高分子量条带很锐利,但低分子量条带弥散 | 琼脂糖凝胶浓度太低 | 提高琼脂糖浓度,或者改为聚丙烯酰胺电泳 |
凝胶破裂、融化 | 电压太高,特别对于低熔点琼脂糖或低张力凝胶 | 降低电压,在较低的温度下运行电泳 |
附产品订购表格