随机突变,自行调整突变几率,使用更加便捷 !
定点突变,轻松实现高保真、扩增超长序列!
想要筛选出亲和力最佳的抗体?
想要得到催化活性更高的蛋白酶?
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可是没想到一开始就停滞不前
突变率太高,大多数蛋白都失去活性,根本没法进行后续研究
突变率太低,得到的几乎都是野生型,筛选鉴定变得毫无意义
碧云天最新推出重磅新品QuickMutation™基因随机突变试剂盒和QuickMutation™Plus基因定点突变试剂盒。
QuickMutation™基因随机突变试剂盒,采用一种全新的专门用于易错PCR的DNA聚合酶——RandomMut DNA polymerase,在配套的反应缓冲液中加入推荐量的Mutation enhancer情况下,可以在每kb的基因中引入约7-8个随机突变,同时还会引入适量的插入和缺失突变。
产品特点:
● AT→GC和GC→AT两个方向的突变基本均衡,(AT→GC mutations) / (GC→AT mutations) = 1.06
● 扩增得到的DNA片段为黏性末端,可以直接用于常规的T载体克隆
● 可扩增长达6kb的目的片段
● 可以自行调整突变几率,使用更加便捷!通过改变Mutation enhancer的用量可以显著影响突变率(参见表1)
表1. 利用QuickMutation™基因随机突变试剂盒使用不同浓度的Mutation enhancer PCR扩增1000bp片段后双酶切插入空载体,然后随机挑选若干克隆进行测序分析的结果。
0.5X Mutation enhancer | 1X Mutation enhancer | 2X Mutation enhancer | ||||
Total mutations found | 63 | 98 | 134 | |||
Mutations | Mutations | Percentage | Mutations | Percentage | Mutations | Percentage |
A→T | 8 | 12.7% | 10 | 10.2% | 21 | 15.7% |
A→G | 10 | 15.9% | 13 | 13.3% | 21 | 15.7% |
A→C | 1 | 1.6% | 2 | 2.0% | 4 | 3.0% |
T→A | 7 | 11.1% | 10 | 10.2% | 15 | 11.2% |
T→G | 1 | 1.6% | 4 | 4.1% | 2 | 1.5% |
T→C | 8 | 12.7% | 15 | 15.3% | 17 | 12.7% |
G→A | 11 | 17.5% | 13 | 13.3% | 10 | 7.5% |
G→T | 1 | 1.6% | 6 | 6.1% | 6 | 4.5% |
G→C | 2 | 3.2% | 4 | 4.1% | 8 | 6.0% |
C→A | 2 | 3.2% | 3 | 3.1% | 8 | 6.0% |
C→T | 5 | 7.9% | 10 | 10.2% | 13 | 9.7% |
C→G | 3 | 4.8% | 3 | 3.1% | 4 | 3.0% |
Insertions | 1 | 1.6% | 1 | 1.0% | 0 | 0.0% |
Deletions | 3 | 4.8% | 4 | 4.1% | 5 | 3.7% |
Bias Indicators (AT→GC/GC→AT) | ||||||
(AT→GC) / (GC→AT) | 1.05 | 1.06 | 1.19 | |||
A→N, T→N | 19+16=35 | 55.6% | 25+29=54 | 55.1% | 46+34=80 | 59.7% |
G→N, C→N | 14+10=24 | 38.1% | 23+16=39 | 39.8% | 24+25=49 | 36.6% |
Transitions | ||||||
A→G, T→C | 18 | 28.6% | 28 | 28.6% | 38 | 28.4% |
G→A, C→T | 16 | 25.4% | 23 | 23.5% | 23 | 17.2% |
Transversions | ||||||
A→T, T→A | 15 | 23.8% | 20 | 20.4% | 36 | 26.9% |
A→C, T→G | 2 | 3.2% | 6 | 6.1% | 6 | 4.5% |
G→C, C→G | 5 | 7.9% | 7 | 7.1% | 12 | 9.0% |
G→T, C→A | 3 | 4.8% | 9 | 9.2% | 14 | 10.4% |
Insertions and Deletions | ||||||
Insertions | 1 | 1.6% | 1 | 1.0% | 0 | 0.0% |
Deletions | 3 | 4.8% | 4 | 4.1% | 5 | 3.7% |
Mutation Frequency | ||||||
Mutations/kb (per PCR) | 5.5 | 7.8 | 10.7 | |||
突变碱基数范围 | 0-11 | 3-12 | 4-18 |
什么?不要随机想要定点突变?
没问题,我们当然满足您!
碧云天QuickMutation™Plus基因定点突变试剂盒,轻松实现高保真、扩增超长序列!快速完成超大质粒(10-35kb)的点突变、多个临近密码子的突变、单个或多个临近密码子的缺失或插入突变。
试剂盒通过改良采用保真性更强,灵敏度更高,扩增速度2kb/min,扩增长度35kb的BeyoAmp™ Extra-long DNA Polymerase,大大缩短突变反应所需时间,进一步提高定点突变成功率!以pcDNA3.1-SRCAP(14566bp)质粒进行点突变测试,实测突变率100%!
图1.对 pcDNA3.1-SRCAP(14566bp)质粒进行点突变的实际效果图。A. 使用本试剂盒进行点突变获得的LB平板照片。B. 阴性对照LB平板照片。与A相比没有添加BeyoAmp™ Extra-long DNA Polymerase。C. 突变前后的测序图。箭头所示为拟突变的两个位点,红色下划线的为突变前和突变后的碱基。
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产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 价格 |
D0206 | QuickMutation™基因定点突变试剂盒 | 10次 | |
D0208S | QuickMutation™ Plus基因定点突变试剂盒 | 10次 | |
D0219S | QuickMutation™基因随机突变试剂盒 | 50次 | |
D0219M | QuickMutation™基因随机突变试剂盒 | 200次 |