据世界卫生组织统计，截至5月8日上午，全球范围内的新冠肺炎大流行已导致390多万确诊病例，超27万人死亡。新型冠状病毒COVID-2019仍然是公众最关注的的话题。

核酸扩增是核酸分子诊断的关键技术。根据核酸扩增反应中温度变化要求，可以将核酸扩增技术分为两大类：一类是PCR核酸扩增技术，另一类是核酸恒温扩增技术。核酸恒温扩增技术是扩增反应的全过程均在同一温度下进行，不须像PCR反应那样需要经历几十个温度变化的循环过程。这一特点使得它们对扩增所需仪器的要求大大简化，反应时间大大缩短，因而具有巨大的应用价值，成为分子诊断行业发展中的热点。截至目前数个利用核酸恒温扩增技术所研发的新冠病毒核酸快速检测试剂盒已获批，加入到这场看不见硝烟的“保卫战”中。而在恒温扩增中，相应的DNA聚合酶扮演者极其重要的角色。
碧云天重磅推出核酸等温扩增新利器——phi29 DNA聚合酶！
碧云天生产的phi29 DNA Polymerase，即phi29 DNA聚合酶，是一种重组表达纯化的源于嗜热脂肪芽孢杆菌Bacillus subtilis噬菌体phi29的DNA聚合酶。phi29 DNA聚合酶具有DNA链置换 (strand displacement) 活性和很强的DNA连续合成能力(processive synthesis property)，可以合成超过70kb的长度，常用于在体外进行不依赖于热循环的等温DNA扩增(isothermal DNA amplification，也常简称为等温扩增)。

产品特点：

▶  高保真性
phi29 DNA Polymerase具有3’→5’外切酶活性，因此可保证扩增反应的高保真性。
▶  具备很强的链亲和力
phi29 DNA Polymerase底物倾向于是单链DNA或单链RNA，也可以扩增线状或者环状的双链DNA。单次聚合反应可以实现长度超过70kb的连续聚合延伸，从而适合用于对全基因组进行稳定扩增。

产品用途：

1.高保真等温PCR
2.滚环复制(Rolling Circle Replication，RCA)，
3.多重置换扩增(Multiple Displacement Amplification，MDA)
4.单细胞、病原微生物以及宏基因组的全基因组扩增
5.干血斑样本扩增DNA
6.SNP基因分型
7.STR/微卫星分析
8.protein-primed DNA扩增
9.RNA-primed DNA扩增
10.致死基因的无细胞体系的克隆等

产品效果：

phi29 DNA Polymerase可在3-16小时内可实现对动物细胞基因组、环状质粒以及线性单链DNA的有效扩增(图1，图2和图3)。

图1. 碧云天生产的phi29 DNA Polymerase和国外N公司的同类产品(Competitor phi29 DNA Polymerase)催化Hela细胞基因组DNA扩增效果对比图。图A为30℃孵育2h效果图，图B为30℃孵育16h效果图。反应体系为20μl：2μl 10X Reaction Buffer，1μl Random Hexamer Primer (100 μM)，1μl dNTP (2.5 mM each)，1μl Hela细胞基因组DNA (20 ng/μl)，14μl Nuclease-free Water，95℃孵育5 min，冰浴2 min后加入1μl不同稀释倍数 (1、2、4、8、16倍稀释)的phi29 DNA Polymerase，反应完毕后，加入4μl 6X DNA Loading buffer (D0071, Beyotime)，取10μl反应产物，使用1%琼脂糖凝胶电泳检测其扩增效果。1. 未添加Hela细胞基因组DNA但加入正常量的phi29 DNA Polymerase；2. 未添加phi29 DNA Polymerase；3-7分别为phi29 DNA Polymerase的稀释倍数为1、2、4、8和16倍。从上图的检测效果来看，碧云天生产的phi29 DNA Polymerase能很好地扩增基因组DNA，并且其扩增效果优于国外N公司的同类产品。

图2. 碧云天生产的phi29 DNA Polymerase和国外N公司的同类产品(Competitor phi29 DNA Polymerase)催化环状质粒DNA pCMV-N-DsRed (4959bp, D2705)扩增效果对比图。图A为30℃孵育2h效果图，图B为30℃孵育16h效果图。反应体系为20μl：2μl 10X Reaction Buffer，1μl Random Hexamer Primer (100 μM)，1μl dNTP (2.5 mM each)，1μl 5kb环状质粒DNA (pCMV-N-DsRed，5 ng/μl)，14μl Nuclease-free Water，95℃孵育5 min，冰浴2 min后加入1μl不同稀释倍数 (1、2、4、8、16倍稀释)的phi29 DNA Polymerase，反应完毕后，加入4μl 6X DNA Loading buffer (D0071)，取10μl反应产物，使用1%琼脂糖凝胶电泳检测其扩增效果。1. 未添加pCMV-N-DsRed但加入正常量的phi29 DNA Polymerase；2. 未添加phi29 DNA Polymerase；3-7分别为phi29 DNA Polymerase的稀释倍数为1、2、4、8和16倍。从上图的检测效果来看，碧云天生产的phi29 DNA Polymerase能很好地扩增质粒，并且其扩增效果优于国外N公司的同类产品。

图3. 碧云天生产的phi29 DNA Polymerase和国外N公司的同类产品(Competitor phi29 DNA Polymerase)催化线性单链DNA扩增效果对比图。图A为反应2h效果图，图B为反应16h效果图。反应体系为20μl：2μl 10X Reaction Buffer，1μl Random Hexamer Primer (100 μM)，1μl dNTP (2.5 mM each)，1μl M13单链DNA (5ng/μl)，14μl Nuclease-free Water，95℃孵育5 min，冰浴2 min后加入1μl不同稀释倍数(1、2、4、8、16倍稀释)的phi29 DNA Polymerase。反应完毕后，加入4μl 6X DNA Loading buffer (D0071, Beyotime)，取10μl反应产物，使用1%琼脂糖凝胶电泳检测其扩增效果。1. 未添加M13单链DNA但加入正常量的phi29 DNA Polymerase；2. 未添加phi29 DNA Polymerase；3-7分别为phi29 DNA Polymerase的稀释倍数为1、2、4、8和16倍。从上图的检测效果来看，碧云天生产的phi29 DNA Polymerase能很好地扩增单链DNA，并且其扩增效果优于国外N公司的同类产品。

订购信息：

产品编号	产品名称	包装	产品价格
D7053S	phi29 DNA Polymerase	250U	158.00
D7053M	phi29 DNA Polymerase	1kU	498.00
D7053L	phi29 DNA Polymerase	5kU	1898.00
D7053XL	phi29 DNA Polymerase	20kU	5998.00