Gibson组装是DNA组装技术的奠基之作,因其最初被用于人造生命构建而闻名遐迩。由于其相对于其他方法还具有方便快捷的特点逐渐被越来越多的用于生物学实验室的日常普通克隆。
其基本原理可以概括为三步:
(1) T5核酸外切酶从DNA片段的5'末端开始消化,产生互补的单链3'末端(overhangs),促使互补的末端退火;
(2) DNA聚合酶填补退火片段的缺口(gaps);
(3) DNA连接酶将组装后的切刻(nicks)处进行连接,最后得到一个完整的双链DNA!
本周将为您上新Gibson组装必备工具酶——T5 Exonuclease。
碧云天生产的T5 Exonuclease,是一种按照5'→3'方向降解双链或单链DNA的核酸外切酶,既能从单链或双链DNA 5'末端起始消化,也可以从线性或环状双链DNA的缺口(gap)或缺刻(nick)处起始消化。
产品用途:
1. 常用于Gibson组装;
2. 降解线性单链、双链DNA或缺刻质粒DNA;
3. 从连接的环状双链DNA中去除不完全连接产物;
4. 降解线性和缺刻质粒DNA,以获得高纯度的超螺旋质粒DNA;
5. 去除碱裂法提取质粒过程中产生的变性质粒DNA;
6. 提高小量抽提质粒cDNA文库的转染效率。
产品效果:
图1. 碧云天生产的T5 Exonuclease消化线性dsDNA的效果图
图2. 碧云天生产的T5 Exonuclease消化线性ssDNA的效果图
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
D7082S | T5 Exonuclease | 1000U | |
D7082M | T5 Exonuclease | 5000U | |
D7082L | T5 Exonuclease | 20kU |