图1. pCMV-AT1.03质粒转染Hela细胞后的ATP荧光探针表达效果图。A图为明场照片,B图为荧光照片。
图2. pCMV-NLS-AT1.03质粒转染Hela细胞后的ATP荧光探针表达效果图。A图为明场照片,B图为荧光照片。
图3. pCMV-Mito-AT1.03质粒转染Hela细胞后的ATP荧光探针表达效果图。A图为明场照片,B图为荧光照片。
又是荧光新产品?
没错!碧云天荧光质粒家族又添新成员啦
本次为大家介绍的是ATP荧光探针系列质粒新品!
pCMV-AT1.03 (ATP荧光探针)
pCMV-NLS-AT1.03(细胞核ATP荧光探针)
pCMV-Mito-AT1.03 (线粒体ATP荧光探针)
该系列质粒是碧云天自行研发的含有CMV启动子用于在哺乳动物细胞中表达AT1.03蛋白以作为ATP荧光探针的工具质粒,表达的ATP荧光探针被称为ATeam,即基于FoF1-ATP合成酶 ε 亚基的ATP指示剂。AT1.03是一种低亲和力的ATeam (Kd=3.3mM at 37℃),可以检测毫摩尔级的ATP水平。该系列质粒在转染哺乳动物细胞后,可根据AT1.03蛋白主要分布位置来实时监测该位置处的ATP浓度变化。
质粒特点及用途详见下表:
质粒名称 | AT1.03蛋白主要分布 | 质粒用途 | 质粒抗性 | 启动子类型 |
pCMV-AT1.03质粒 | 细胞质 | 实时监控细胞质内的ATP浓度变化; | 卡那霉素抗性 | CMV启动子 |
pCMV-NLS-AT1.03 (细胞核ATP荧光探针) | 细胞核 | 实时监控细胞核内的ATP浓度变化; 也可以用作细胞核荧光探针,在活细胞中或细胞固定后标记细胞核的位置和形态。 |
卡那霉素抗性 | CMV启动子 |
pCMV-Mito-AT1.03 (线粒体ATP荧光探针) | 线粒体 | 实时监控线粒体内的ATP浓度变化; 也可以用作线粒体荧光探针,在活细胞中或细胞固定后标记线粒体的位置和形态。 |
卡那霉素抗性 | CMV启动子 |
产品效果:
图1. pCMV-AT1.03质粒转染Hela细胞后的ATP荧光探针表达效果图。A图为明场照片,B图为荧光照片。
图2. pCMV-NLS-AT1.03质粒转染Hela细胞后的ATP荧光探针表达效果图。A图为明场照片,B图为荧光照片。
图3. pCMV-Mito-AT1.03质粒转染Hela细胞后的ATP荧光探针表达效果图。A图为明场照片,B图为荧光照片。
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
D2604-1µg | pCMV-AT1.03 (ATP荧光探针) | 1µg | |
D2604-100µg | pCMV-AT1.03 (ATP荧光探针) | 100µg | |
D2605-1µg | pCMV-NLS-AT1.03 (细胞核ATP荧光探针) | 1µg | |
D2605-100µg | pCMV-NLS-AT1.03 (细胞核ATP荧光探针) | 100µg | |
D2606-1µg | pCMV-Mito-AT1.03 (线粒体ATP荧光探针) | 1µg | |
D2606-100µg | pCMV-Mito-AT1.03 (线粒体ATP荧光探针) | 100µg |
pET-N-His-TEV-QUEEN2m (细菌ATP荧光探针)
pET-N-His-TEV-QUEEN7µ (高灵敏度细菌ATP荧光探针)
pET-N-His-TEV-QUEEN NA (ATP荧光探针对照质粒)
该系列质粒是碧云天研发的用于在细菌中表达N端带有His标签的QUEEN NA,QUEEN2m及QUEEN7µ融合蛋白作为ATP荧光探针的原核工具质粒,QUEEN是一个单一的环状排列的荧光蛋白和细菌ATP结合蛋白融合表达而成,对细菌生长速率的改变不敏感。许多细菌细胞内根据QUEEN的荧光所计算的胞内ATP浓度与根据萤火虫荧光素酶方法检测所计算得出的胞内ATP浓度几乎完全一致,因此QUEEN适合用于定量检测细菌内的绝对ATP浓度。QUEEN7µ是高亲和力的ATP荧光探针,QUEEN2m是低亲和力的ATP荧光探针,QUEEN NA是QUEEN2m的突变体,可用作QUEEN2m或QUEEN 7µ的阴性对照。
质粒名称 | 质粒用途 |
pET-N-His-TEV-QUEEN2m (细菌ATP荧光探针) | 低亲和力ATP荧光探针,适合检测ATP的生理浓度(Kd~4.5mM at 25℃),可用于活体实时检测单个细菌内ATP水平或QUEEN2m的原核表达纯化。 |
pET-N-His-TEV-QUEEN7µ (高灵敏度细菌ATP荧光探针) | 高亲和力的ATP荧光探针(Kd~7µM at 25℃),对于特定条件导致的细菌内低ATP水平时,比较适合使用QUEEN7µ进行ATP的荧光检测;可用于活体实时检测单个细菌内ATP水平或QUEEN7m的原核表达纯化。 |
pET-N-His-TEV-QUEEN NA (ATP荧光探针对照质粒) | QUEEN-NA对ATP无亲和作用,可用于活体实时检测单个细菌内ATP水平时的对照,也可以用于QUEEN NA的原核表达纯化。 |
产品特点:
1. 含有T7启动子/lac操纵子,可以在异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下高效启动目的蛋白表达;
2. N端带有His标签,可应用相应的纯化介质进行纯化,His标签后含有TEV酶切位点,可通过TEV Protease切除N端的His标签;
3. 该系列质粒为卡那霉素抗性。
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
D2906-1µg | pET-N-His-TEV-QUEEN2m (细菌ATP荧光探针) | 1µg | |
D2906-100µg | pET-N-His-TEV-QUEEN2m (细菌ATP荧光探针) | 100µg | |
D2907-1µg | pET-N-His-TEV-QUEEN7µ (高灵敏度细菌ATP荧光探针) | 1µg | |
D2907-100µg | pET-N-His-TEV-QUEEN7µ (高灵敏度细菌ATP荧光探针) | 100µg | |
D2909-1µg | pET-N-His-TEV-QUEEN NA (ATP荧光探针对照质粒) | 1µg | |
D2909-100µg | pET-N-His-TEV-QUEEN NA (ATP荧光探针对照质粒) | 100µg |