蛋白质的抽提是蛋白相关实验中常用的技术方法。巧妇难为无米之炊,能够提取到高质量的蛋白一直是做好后续实验的关键步骤。为了更好的服务大家的科学研究,碧云天隆重推出三款分别适合于细菌、昆虫、哺乳动物样品的BeyoLytic™活性蛋白抽提试剂产品。
细菌的裂解效果优于超声处理!!!
该系列三款产品的信息如下:
产品编号 | P0013Q | P0013M | P0013S |
产品名称 | BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂 | BeyoLytic™哺乳动物活性蛋白抽提试剂 | BeyoLytic™昆虫活性蛋白抽提试剂 |
产品用途 | 大肠杆菌表达的可溶性蛋白抽提和包涵体洗涤 | 哺乳动物细胞或组织的细胞浆蛋白、细胞核蛋白以及膜蛋白的活性蛋白抽提 | 昆虫细胞或昆虫组织的细胞浆蛋白、细胞核蛋白以及膜蛋白的活性蛋白抽提 |
同类产品 | Sigma:CelLytic™ B (B7435)、CelLytic™ B Plus Kit (CB0500/CB0050); Thermo:B-PER® Bacterial Protein Extraction Reagent (78243/78248/90084)、B-PER® II Bacterial Protein Extraction Reagent (78260)、B-PER® Direct Bacterial Protein Extraction Kit (90080/90081)、B-PER™ with Enzymes Bacterial Protein Extraction Kit (90078/90079) | Thermo:M-PER® Mammalian Protein Extraction Reagent;Sigma:CelLytic™ M mammalian cell lysis/extraction reagent | Thermo:I-PER® Insect Cell Protein Extraction Reagent (89802) |
下游实验 | 标签蛋白的纯化、ELISA、Western blot、IP、酶活性检测、荧光蛋白检测等。 | WB、IP、Co-IP、ELISA、报告基因酶活性检测、蛋白激酶活力检测、标签蛋白分离纯化。 | 标签蛋白分离纯化、WB、IP、Co-IP、ELISA、常规生化分析、报告基因酶活性检测、蛋白激酶活力检测。 |
注意事项 | 对于特殊的菌株,如果抽提效果不太理想,可以考虑进行冻融处理。 | 所含的去垢剂比较温和,对于一些难溶性蛋白的抽提效率相对较低。 | 所含的去垢剂比较温和,对于一些难溶性蛋白的抽提效率相对较低 |
这些产品的特点有哪些呢?以BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂为例:
产品特点:
● 蛋白抽提效果好:能够达到国内外同类产品产品相近的使用效果和用途;
● 蛋白抽提快速有效:本产品能通过一步法快速(15min)有效地裂解细菌、抽提细菌细胞质和细胞核内的蛋白,提取过程中无需繁琐的超声或者高压破菌操作;
● 蛋白抽提活性高:本产品所含去垢剂经过筛选,与传统方法相比,提取的蛋白通常能很好地保持蛋白原有的结构和生物学活性,可用于多种生物化学和分子生物学用途;
● 用途广泛:本产品不仅可用于抽提可溶性蛋白,也可用于洗涤去除粘附在包涵体表面的细胞碎片以获得高纯度的包涵体蛋白;
● 兼容性好:提取的蛋白兼容常见下游实验操作如His或GST等标签蛋白的纯化、ELISA、Western blot、IP、酶活性检测、荧光蛋白检测等;
● 灵活性高:可根据抽提蛋白特性加入相应的蛋白酶磷酸酶抑制剂等,同时本产品采用Tris-HCl缓冲系统,蛋白提取后的相关纯化操作,可以使用相同的缓冲系统。
产品效果:
图1. BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂对于细菌的裂解效果图。A. 表达EGFP蛋白的细菌不同裂解时间抽提产物的荧光强度。B. 对应A图中不同裂解时间点,蛋白在上清和沉淀中的分布情况。泳道1、3、5、7、9、11、13依次是裂解1、2、5、10、15、20和30min的上清;泳道2、4、6、8、10、12、14依次是裂解1、2、5、10、15、20和30min的沉淀。
图2. BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂与超声破碎法裂解细菌的效果比较图。A. 表达GST-EGFP的细菌用超声法和本产品裂解不同时间获得的抽提产物的荧光强度。B. 对应A图中使用BeyoLytic™细菌活性蛋白抽提试剂抽提的不同时间点,蛋白在上清和沉淀中的分布情况。泳道1、3、5、7依次是抽提5min、10min、15min和20min的上清;泳道2、4、6、8依次是抽提5min、10min、15min和20min的沉淀。C. 对应A图中不同超声时间点,蛋白在上清和沉淀中的分布情况。泳道1、3、5、7、9依次是抽提2min、5min、10min、15min和20min的上清;泳道2、4、6、8、10依次是抽提2min、5min、10min、15min和20min的沉淀。
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