随着CRISPR/Cas9技术的问世，基因组的“改写”乃至“全新设计”正逐渐成为现实。为助力科研，碧云天推出了Cas9 Nuclease (SpCas9)，也称Csn1，能在gRNA引导下序列特异性地切割双链DNA的核酸内切酶。本产品可以用于体外筛选高效的guide RNA (gRNA)序列、特定DNA序列在gRNA引导下的剪切、含有特定序列的双链环形DNA的线性化等用途。本产品不含DNA外切酶，不含非gRNA依赖的DNA内切酶，不含RNA酶。

产品原理
CRISPR/Cas9系统由Cas9 Nuclease和gRNA复合物所组成。gRNA，也称sgRNA (single guide RNA)，由18-20bp与靶基因序列互补的CRISPR RNA (crRNA)序列以及能与Cas9特异性结合的trans-activating crRNA (tracrRNA)序列组成。gRNA通过与靶序列之间的互补配对，将Cas9 Nuclease引导至靶DNA，Cas9 Nuclease C端的与PAM (proto-spacer adjacent motif)相互作用的结构域(PAM-interacting domain)识别富含G碱基(5’-NGG-3’)的PAM序列，在HNH和RuvC两个结构域的协同作用下，在PAM序列NGG上游大约三个碱基处产生DNA的双链断裂(Double-strand break, DSB)。如果该双链DNA断裂发生在细胞内，在细胞DNA修复过程中会导致基因靶位点处的插入、删除或替换，从而可能产生移码突变，导致目的基因的缺失突变(图1)。

图1. 碧云天Cas9 Nuclease基因编辑示意图。

产品效果：

图2. 碧云天生产的Cas9 Nuclease酶活性的效果图。gRNA与Cas9结合后，引导后者至pUCm-T与gRNA互补的序列酶切产生2206bp和567bp的片段。如图2所示，本产品与N公司(Competitor)的Cas9 Nuclease具有相当的酶活性。实际效果会因样品种类、检测条件等的不同而存在差异，本图仅供参考。

别忘了碧云天还提供基于CRISPR/Cas9技术的目的基因敲除用质粒、慢病毒或细胞株等产品，并且都经过金标准T7E1法的验证哦~

订购信息：

产品编号	产品名称	包装	产品价格
D0511S	Cas9 Nuclease (SpCas9)	50pmol
D0511M	Cas9 Nuclease (SpCas9)	250pmol
D0511L	Cas9 Nuclease (SpCas9)	1000pmol
D0508S	基因组编辑突变检测试剂盒	25次
D0508M	基因组编辑突变检测试剂盒	100次
D7080S	T7 Endonuclease I (CRISPR等基因突变鉴定用)	250U
D7080M	T7 Endonuclease I (CRISPR等基因突变鉴定用)	1250U
D7080L	T7 Endonuclease I (CRISPR等基因突变鉴定用)	5000U