新型冠状病毒肺炎在全球范围爆发和蔓延后,mRNA疫苗技术得到广泛关注和快速发展。今天小编带领大家一起了解下mRNA疫苗生产过程中的关键酶之一—焦磷酸酶。
多种代谢反应会产生无机焦磷酸,焦磷酸酶可水解无机焦磷酸盐,可以避免无机焦磷酸对反应的抑制,并且提供热力学动力促使反应向正向进行,从而常用于RNA体外转录、DNA复制和扩增如HDA或LAMP等温扩增等。尤其在工业化生产mRNA疫苗的时候会产生大量的无机焦磷酸盐,为了保证mRNA疫苗高效生产,可以添加无机焦磷酸酶,解除生成的无机焦磷酸盐对反应体系的抑制。
碧云天生产的Pyrophosphatase, Inorganic (yeast),是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台通过大肠杆菌表达、纯化获得的可用于催化无机焦磷酸盐水解为正磷酸盐(Orthophosphate)的高品质重组酶。
产品特点
性能优:与国外同类产品效果一致;
用途广:用于体外转录(比如mRNA疫苗制备)、DNA聚合反应、焦磷酸盐测定法进行SNP基因分型等各种需要去除焦磷酸污染的实验;
性价比高:碧云天自主研发,超高性价比。
产品效果
图2. 碧云天生产的Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)与国外N公司(Competitor N)的Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)对焦磷酸钠的水解效果对比图。利用碧云天Malachite Green Phosphate Detection Kit (S0195)检测焦磷酸钠水解所产生的磷酸。将碧云天与N公司的Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)分别稀释100、120、150、200、300、500、1000倍,然后配制500μl反应体系: 100mM Tris-HCl (pH8.0), 2mM MgCl2, 2mM焦磷酸钠, 1μl上述不同稀释度的Pyrophosphatase, Inorganic (yeast),25℃水浴10min。样品孵育期间,将磷酸盐标准品用双蒸水稀释至0、5、10、20、30、40、50μM,并将不同浓度的磷酸盐标准品和孵育好的反应体系各取50μl至96孔板(FPT011)中。提前将Malachite Green Reagent A、Malachite Green Reagent B、Malachite Green Reagent C和双蒸水按照体积比2:1:1:2混合,室温静置30min,待溶液颜色变为浅黄色,显色即可使用。每孔加入200μl显色剂,用移液器轻轻吹打混匀,室温静置30min。用酶标仪测定A630 (本实验测定波长在620-660nm之间,630nm最佳)。根据标准曲线计算出样品中所产生的磷酸根浓度,进而计算磷酸根的生成速率(单位为nmol/min)。以上数据来自三次独立重复实验。碧云天生产的Pyrophosphatase, Inorganic (yeast)与N公司的产品相比,对焦磷酸具有基本一致的水解效果。图中数据仅供参考,不同实验条件下获得的数据会有一定的差异。
产品信息产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
R7025S | Pyrophosphatase, Inorganic (yeast) | 10U | |
R7025M | Pyrophosphatase, Inorganic (yeast) | 50U | |
R7025L | Pyrophosphatase, Inorganic (yeast) | 200U | |
R7025XL | Pyrophosphatase, Inorganic (yeast) | 1000U |