与常规PCR相比,环介导核酸等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,具有简单、快速、灵敏性高、特异性强等特点。
基于此原理,碧云天全新推出BeyoColor™支原体等温扩增变色检测试剂盒,通过LAMP法扩增支原体DNA,并且通过颜色变化即可确定是否有支原体污染,无需电泳。
检测效果
图1. 碧云天BeyoColor™支原体等温扩增变色检测试剂盒(C0305)的检测效果图。
产品简介
BeyoColor™支原体等温扩增变色检测试剂盒利用环介导等温扩增(Loop Mediated Isothermal Amplification, LAMP)法扩增支原体DNA,并通过反应体系的颜色变化检测培养的细胞等生物材料中是否有支原体污染。本试剂盒采用了dU掺入和UDG酶防止等温扩增产物污染技术,可快速、有效、高灵敏度地检测支原体污染,并且采用可视化变色技术,无需电泳,通过肉眼观察颜色变化即可判断结果。与巢式PCR法和qPCR法相比,检测时间短、无需特殊仪器,更加方便快捷!
产品特点
● 防污染技术,有效避免污染:dUTP/UDG酶防污染系统有效消除扩增过程产物污染问题;
● 灵敏度高,反应时间短:灵敏性比传统的PCR方法高2-5个数量级,通过阳性质粒计算检测下限约为20-200 copies/μl。且仅需1个小时就能完成检测反应;
● 特异性强,检测范围广:本试剂盒根据支原体的16S rRNA保守基因组序列,设计了多条特异性LAMP引物,特异性扩增支原体DNA,可以扩增约45种支原体,细胞污染常见的支原体种类都可以检测出;
● 可视化变色技术,无需电泳:优化指示剂染料,反应管内液体的颜色变成天蓝色或深天蓝色即为支原体阳性。
本试剂盒还为大家提供了阳性对照Myco Positive Control,可用于确定试剂盒是否能正常工作。Myco Positive Control不含支原体,无支原体污染风险。建议每次检测都设置阳性对照。
同时上线的还有BeyoDirect™支原体qPCR检测试剂盒,该产品无须提取样品中DNA或RNA,可以直接使用细胞培养液或血清等样品,通过探针法qPCR 高灵敏检测细胞等生物材料中是否有支原体污染。可快速、有效、高灵敏地检测支原体污染。
产品特点
● 特异性强、灵敏度高:特异性扩增支原体DNA,不会扩增细菌、真菌、真核细胞DNA;通过阳性对照计算出的检测下限约为2-20 copies/μl;
● 反应体系完整:提供了qPCR实验所需的所有通用组分,同时提供阳性对照和内对照DNA;
● 兼容多种设备:适用于具有FAM和VIC检测通道的荧光定量PCR仪;
● 检测范围广:可以扩增和检测39种支原体,包括实验室常见的支原体;
● 操作便捷:可直接检测含支原体的细胞培养液上清、血清等样品,无须单独提取DNA。
检测效果
图2. 碧云天支原体qPCR检测试剂盒(C0303)用于阳性对照和阴性对照的检测效果。左图是试剂盒中的阳性对照,右图是试剂盒中的Nuclease-free water作为阴性对照,两组对照同时添加了内参对照DNA,FAM为支原体检测信号,VIC为内参对照检测信号。左图的支原体和内对照检测曲线正常,而右图仅内参对照检测曲线正常,支原体为阴性。
支原体探针(FAM标记) | 内对照探针(VIC标记) | 结果判断 |
典型S型扩增曲线且Ct值≤33 | 典型S型扩增曲线且Ct值≤33 | 阳性 |
无典型S型扩增曲线或Ct值>35 | 典型S型扩增曲线且Ct值≤33 | 阴性 |
无典型S型扩增曲线或Ct值>35 | 无典型S型扩增曲线或Ct值>35 | PCR抑制 |
产品信息:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0303 | BeyoDirect™支原体qPCR检测试剂盒 | 100次/500次 |
C03053 | BeyoColor™支原体等温扩增变色检测试剂盒 | 25次/100次 |
此外,碧云天提供多种支原体检测试剂盒,各有优势,大家可根据实验室具体情况,选择不同的方法,或几种方法联合使用。
产品名称 | 产品编号 | 检测方法 | 产品优势 |
Myco-Lumi™发光法支原体检测试剂盒 | C0297/C0298 | 化学发光法 | 无需PCR,仅15min即可完成检测 |
支原体染色试剂盒 | C0296 | 原位染色法 | 清晰、直观 可看到支原体微粒 |
支原体PCR检测试剂盒 | C0301S | 巢式PCR法 | 可根据条带大小确定支原体种类 |
BeyoDirect™支原体qPCR检测试剂盒 | C0303 | 探针法qPCR | 无需提取DNA,可直接进行PCR;特异性扩增支原体DNA,灵敏度高 |
BeyoColor™支原体等温扩增变色检测试剂盒 | C0305 | 等温扩增变色法 | 避免产物污染,通过肉眼观察颜色即可判断结果 |
如果发现有支原体污染,优先建议更换无污染的细胞进行培养。如果有必要预防或去除支原体,可使用专用的支原体预防或去除试剂,如Myco-Zero™支原体去除试剂(C0280)、Myco-Zero™ Plus支原体去除试剂(C0285)、Myco-Zero™支原体去除喷雾剂(C0283)等。
相关产品
产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
C0280 | Myco-Zero™支原体去除试剂 | 5/20/100次 | // |
C0285 | Myco-Zero™ Plus支原体去除试剂 | 50/250/1000次 | // |
C0283 | Myco-Zero™支原体去除喷雾剂 | 500ml/2L | / |
C0288 | 支原体清除试剂 | 20/100mg | / |
C0290 | 支原体清除试剂Plus | 10/50mg | / |
C0292 | 支原体预防去除试剂I | 2/10ml | / |
C0293 | 支原体预防去除试剂II | 2/10ml | / |
C0296 | 支原体染色检测试剂盒 | >100次 | |
C0297 | Myco-Lumi™发光法支原体检测试剂盒(低灵敏度仪器用) | 20/100次 | / |
C0297FT | Myco-Lumi™发光法支原体检测试剂盒(低灵敏度仪器用) (试用装) | 5次 | |
C0298 | Myco-Lumi™发光法支原体检测试剂盒(高灵敏度仪器用) | 20/100次 | / |
C0299S | Myco-Lumi™发光法支原体检测阳性对照 | 20次 | |
C0301S | 支原体PCR检测试剂盒 | 250次 | |
C0303 | BeyoDirect™支原体qPCR检测试剂盒 | 100/500次 | / |
C0305 | BeyoColor™支原体等温扩增变色检测试剂盒 | 25/100次 | / |