巯基传统的测定方法主要有高效液相色谱法(HPLC)、毛细管电泳法(CE)、液相色谱-质谱联用法(HPLC-GC)等。虽然这些方法在游离巯基检测的灵敏度和准确度上有一定优势，但是样品处理和实验操作相对复杂、对仪器的要求较高、检测耗时较长、且无法同时检测多个样品。

碧云天生产的游离巯基检测试剂盒(DTNB法)采用经典的基于DTNB的游离巯基定量检测方法，可通过吸光度高效、便捷的检测细胞培养上清液、血清、血浆、细胞及组织裂解液样品中暴露的或表面的游离巯基。

产品原理
游离巯基(R-SH)与DTNB反应生成黄色可检测的2-硝基-5-硫代苯甲酸盐阴离子(TNB)和混合二硫化物(R-S-TNB)，TNB在412nm处有强吸收峰，通过酶标仪测定此处的吸光度，并以谷胱甘肽为标准品，可计算出样品中游离巯基含量，原理图如下：

图1.碧云天游离巯基检测试剂盒(DTNB法) (S0138)工作原理图。

产品效果

图2.碧云天游离巯基检测试剂盒(DTNB法) (S0138)用于GSH标准曲线的检测效果图。

产品特点
●   样品处理简单，检测速度快：对于细胞培养上清液、血清、血浆可直接检测；对于细胞及组织样品只需匀浆裂解，取上清进行检测；整个检测过程不足半小时即可完成；
●   灵敏度高，结果准确：本试剂盒最低检测限约为10μM，提供的Assay Buffer经过优化，可螯合可以氧化巯基的二价金属离子，防止样品被氧化导致样品中巯基含量低于实际值；
●   组分齐全，无需自备：提供了检测所需的DTNB和Assay Buffer，同时还提供GSH作为标准品或阳性对照，用户仅需自备样品即可。

特别提示：本试剂盒仅可检测暴露的或表面的游离巯基，如需检测总游离巯基，可使用总巯基检测试剂盒(DTNB法) (S0141)，两者配合使用即可计算出在蛋白质高级结构中的游离巯基含量；如需检测蛋白质总巯基或总半胱氨酸巯基含量，可使用蛋白质总巯基检测试剂盒(DTNB法) (S0145)，配合使用总巯基检测试剂盒(DTNB法) (S0141)即可计算出蛋白质中二硫键的含量；如需检测谷胱甘肽，可使用总谷胱甘肽检测试剂盒(S0052)、GSH和GSSG检测试剂盒(S0053)。

产品信息：

产品编号	产品名称	包装
S0138S	游离巯基检测试剂盒(DTNB法)	100-200次
S0138M	游离巯基检测试剂盒(DTNB法)	500-1000次

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