CRISPR是一种原核生物利用RNA引导的核酸酶对外源的噬菌体或病毒核酸进行基因沉默的获得性免疫系统，后续在此基础上逐渐发展为广泛应用于原核和真核生物的CRISPR/Cas基因编辑技术。基于crRNA效应复合物中的Cas蛋白，CRISPR-Cas系统分为两类。第Ⅰ类CRISPR-Cas系统利用多蛋白效应复合物发挥作用，目前其可分为3种类型和12种亚型；而第Ⅱ类CRISPR-Cas系统只需用单一的Cas效应蛋白即可对外源核酸序列进行识别和切割，目前其可分为3种类型和9种亚型。第Ⅱ类CRISPR-Cas系统由于作用机制简单，因此受到广泛关注，其中CRISPR-Cas9系统属于第Ⅱ类Ⅱ型，CRISPR-Cas12a系统属于第Ⅱ类Ⅴ型，CRISPR-Cas13a系统属于第Ⅱ类Ⅵ型。 Cas9和Cas12在DNA基因编辑中已经得到非常广泛的应用；最近发现Cas13在RNA调控中起重要作用，目前Cas13已应用于转录组工程、病毒干扰、核酸检测和RNA成像等方面。碧云天目前已经拥有全面的常用Cas蛋白哦！包括：Cas9 Nuclease (SpCas9) (D0511)、Cas9 NLS (SpCas9-NLS) (D0513)、Cas9 Nickase (D10A) NLS (D0514)、Cas9 Nickase (H840A) NLS (D0515)、dCas9 NLS (D0516)、FnCas12a (Cpf1) (D0510)和LwaCas13a (D0517)。
那么问题来了，这么多该怎么选择？且看选择指南~
| 产品编号 | 产品名称 | 特点 |
| D0511 | Cas9 Nuclease (SpCas9) | Cas9 Nuclease C端的与PAM (pro相互作用的结构域识别富含G碱基(5’-NGG-3’)的PAM序列，在HNH和RuvC两个结构域的协同作用下，在PAM序列NGG上游大约三个碱基处产生DNA的双链断裂(Double-strand break, DSB),从而特异性地切割双链DNA。 |
| D0513 | Cas9 NLS (SpCas9-NLS) | Cas9 NLS在Cas9蛋白的N端和C端都含有SV40 T抗原的核定位序列(Nuclear localization signal or nuclear localization sequence, NLS)，使Cas9与gRNA形成的复合物在转染进入细胞后、能迅速地从细胞质进入到细胞核内，从而大大地提高了基因编辑的效率。 |
| D0514 | Cas9 Nickase (D10A) NLS | Cas9 Nickase (D10A) NLS是通过对Cas9核酸酶的RuvC结构域内的单个氨基酸突变产生的D10A突变体，仅仅切割与gRNA互补的DNA链。 |
| D0515 | Cas9 Nickase (H840A) NLS | Cas9 Nickase (H840A) NLS是通过对Cas9核酸酶的HNH结构域内的单个氨基酸突变产生的H840A突变体，仅仅切割与gRNA非互补的DNA链。 |
| D0516 | dCas9 NLS | dCas9 NLS是通过对Cas9核酸酶的RuvC和HNH结构域内的氨基酸突变产生的D10A/H840A双突变体。与野生型的Cas9核酸酶一样，dCas9 NLS利用gRNA靶向目标DNA序列，但是与切割双链的野生型不同，由于RuvC和HNH结构域的突变，dCas9 NLS仅仅具有由gRNA引导的与DNA结合的活性而没有内切酶活性。 |
| D0510 | FnCas12a (Cpf1) | FnCas12a识别含有TTN的PAM序列，并且FnCas12a的切割位点相对远离其识别位点为多次编辑提供了可能性，这些特点使Cas12a与Cas9可以互为补充。只需简单将guide RNA (gRNA)与Cas12a蛋白相结合，由于该gRNA仅含有crRNA，无需trans-activating crRNA (tracrRNA)即可实现基因编辑的目的。 |
| D0517 | LwaCas13a | LwaCas13a缺乏DNA酶结构域，但具有高等真核生物和原核生物中与核苷酸结合(Higher eukaryotes and prokaryotes nucleotide-binding, HEPN)的两个结构域，这两个结构域参与RNA切割。 |
产品效果
碧云天生产的Cas9 Nuclease (D0511)酶活性的效果图。
碧云天生产的Cas9 NLS (D0513)体外酶活检测的效果图。
碧云天Cas9 Nickase (D10A) NLS (D0514)体外酶活检测的效果图。
碧云天Cas9 Nickase (H840A) NLS (D0515)体外酶活检测的效果图。
碧云天dCas9 NLS (D0516)体外酶活性检测的效果图。
碧云天生产的FnCas12a (Cpf1) (D0510)和N公司的Cas12a酶活性检测对比效果图。
碧云天LwaCas13a (D0517)和G公司的LwaCas13a酶活性检测对比效果图。
产品特点
纯度高：该系列产品均由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得，不含有除目的蛋白外的其他酶类；
活性高：该系列酶类均与知名公司相同产品进行酶活验证对比，均能达到相同甚至更优的效果；
性价比高：碧云天自主研发生产，超高性价比！