宿主DNA残留的片段可能具有免疫原性、感染性或者致瘤性，当其残留水平过高时就可能引发免疫反应、致病性感染以及诱发肿瘤等安全问题。WHO和欧盟要求每剂生物制品中残留的DNA含量不能超过10ng，而FDA甚至要求每剂不能超过100pg，我国药典也规定以细胞基质生产的生物制剂DNA残留量不能超过100pg/剂，以细菌或真菌基质生产的疫苗DNA残留量不能超过10ng/剂。可见，检测和控制宿主DNA残留非常重要！碧云天BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒、大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒和CHO DNA残留探针法qPCR检测试剂盒从提取到检测全方位助力您检测残留DNA！
BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒
碧云天研发生产的BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，用于稳定、高效、便捷地从各种生物制品的中间品、半成品和成品中提取并纯化残留的大肠杆菌、酵母、昆虫或哺乳动物等宿主细胞微量DNA的试剂盒。本试剂盒制备的DNA样品可以用于相关DNA残留qPCR检测试剂盒。
产品原理
本试剂盒的原理和操作流程如图1所示。样品中蛋白首先被蛋白酶K消化，释放出来的基因组DNA在特定条件下与磁珠特异性结合。在外界磁场(如磁分离架)的作用下，磁珠与相应溶液可以快速高效地分离。随后通过两次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液将DNA从磁珠上洗脱下来。整个过程无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，全程仅需约20分钟即可完成。
图1.BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒(D0051)抽提DNA原理示意图。
产品效果
回收率高，有保障！使用E.coli DNA Control模拟样品的回收率测试结果见下表：
| 回收前残留DNA浓度 | 回收前体积 | 回收后残留DNA浓度 | 回收后体积 | 回收率 |
| 30fg/μl | 100μl | 32.6fg/μl | 100μl | 109% |
| 3fg/μl | 100μl | 3.08fg/μl | 100μl | 103% |
注1：回收率和样品浓度、体积、样品种类及实验操作等的不同而存在差异，表中数据仅供参考。
注2：根据中华人民共和国药典(2020年版‧三部)“外源性DNA残留测定法”中“第三法 定量PCR”对于结果计算的要求，加标样品的回收率应在50%~150%之间。
低水平残留DNA也无忧！本试剂盒在提取低至飞克(Femtogram, fg)水平的残留DNA时仍具有较高的回收率，通常无需添加糖原、酵母RNA或Poly A等Carrier RNA或Oligo dT等Carrier DNA。如下表，使用本试剂盒对100μl模拟待测样品(含BSA)以及对应的加标样品(即在待测样品基础上再添加一定量的标准品)进行样品制备操作，并使用碧云天大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7701)检测样品浓度：
| 重复 | 待测样品CT值 | 待测样品lgCT | 待测样品浓度 | 加标样品CT值 | 加标样品lgCT | 加标样品浓度 | 回收率 |
| 1 | 33.53 | 0.97 | 9.36fg/μl | 31.6 | 1.54 | 35.0fg/μl | 85.4% |
| 2 | 34.30 | 0.74 | 5.53fg/μl | 31.84 | 1.47 | 29.7fg/μl | 80.5% |
| 3 | 33.82 | 0.89 | 7.68fg/μl | 31.73 | 1.51 | 32.0fg/μl | 81.1% |
大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒
碧云天研发生产的大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒是一种通过探针法qPCR快速、有效、高灵敏地定量检测各种生物制品样品品中E.coli宿主细胞残留基因组DNA含量的试剂盒。本产品为防污染型，含有优化比例的高品质UDG酶和dUTP，可有效消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题造成的假阳性或CT值偏低。
产品效果
本试剂盒能高效灵敏地检测E.coli宿主细胞的残留DNA，最低检测限可至3fg/μl：
图2.碧云天大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7701)用于不同浓度梯度的阳性对照的扩增曲线及标准曲线。
本试剂盒特异性强，HeLa细胞和CHO细胞基因组DNA对E.coli DNA残留检测无干扰：
图3.碧云天大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7701)检测不同浓度梯度阳性对照以及分别加入10倍量HeLa和CHO细胞基因组DNA的阳性对照的标准曲线。
本试剂盒稳定性高，不同程度的碎片化DNA对E.coli DNA残留检测基本无干扰：
图4.碧云天大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7701)对不同程度碎片化大肠杆菌DNA的检测效果图。
CHO DNA残留探针法qPCR检测试剂盒
碧云天研发生产的CHO DNA残留探针法qPCR检测试剂盒是一种通过探针法qPCR快速、有效、高灵敏、高特异性地定量检测各种生物制品样品中CHO宿主细胞残留基因组DNA含量的试剂盒。本产品为防污染型，含有优化比例的高品质UDG酶和dUTP，可有效消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题造成的假阳性或CT值偏低。
产品效果
本试剂盒能高效灵敏地检测CHO宿主细胞的残留DNA，最低检测限可至飞克(Femtogram, fg)：
| Target | 300pg/μl | 30pg/μl | 3pg/μl | 300fg/μl | 30fg/μl | 3fg/μl | NTC |
| 平均CT值 | 19.4 | 22.84 | 26.24 | 29.72 | 32.78 | 36.25 | Undetermined |
| 平均lgCT | 2.5 | 1.48 | 0.46 | -0.57 | -1.48 | -2.51 | - |
| 浓度 | 315.25pg/μl | 29.86pg/μl | 2.91pg/μl | 268.01fg/μl | 32.94fg/μl | 3.06fg/μl | - |
图5. 碧云天CHO DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7703)用于不同浓度梯度的阳性对照的扩增曲线及标准曲线。
本试剂盒特异性强，HeLa细胞和E.coli细胞基因组DNA对CHO DNA残留检测无干扰：
图6. 碧云天CHO DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7703)检测不同浓度梯度阳性对照以及分别加入3ng HeLa或E.coli细胞基因组DNA的阳性对照的标准曲线。
本试剂盒稳定性高，不同程度的碎片化DNA对CHO DNA残留检测基本无干扰：
图7. 碧云天CHO DNA残留探针法qPCR检测试剂盒(D7703)对不同程度碎片化CHO DNA的检测效果图。
图8. 不同量MNase碎片化处理的CHO基因组DNA的电泳图。
产品信息
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 | 产品价格 |
| D0051S | BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒 | 50次 | |
| D0051M | BeyoMag™磁珠法残留DNA样品制备试剂盒 | 200次 | |
| D7701S | 大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒 | 50次 | |
| D7701M | 大肠杆菌DNA残留探针法qPCR检测试剂盒 | 200次 | |
| D7703S | CHO DNA残留探针法qPCR检测试剂盒 | 50次 | |
| D7703M | CHO DNA残留探针法qPCR检测试剂盒 | 200次 |