碧云天反转录酶的比较与选择
碧云天生产的5种反转录酶的比较和选择请参考下表:
产品编号 | 反转录酶名称 | 扩增长度 | RNaseH活性 | 高速反转录活性 | 耐热性 | cDNA克隆 | qPCR |
D7153 | BeyoRT™ M-MuLV反转录酶 | 13kb | 有 | 无,建议反转录60分钟 | 有,耐受42℃-50℃ | ★★★★ | ★★ |
D7159 D7166 |
BeyoRT™ M-MuLV反转录酶(RNase H-) | 13kb | 无 | 无,建议反转录60分钟 | 有, 42-45℃最佳,耐受55℃ | ★★★★ | ★★ |
D7160 D7168 D7170 |
BeyoRT™II M-MLV反转录酶(RNase H-) | >10kb | 无 | 无,建议反转录60分钟 | 有, 42-45℃最佳,耐受50℃ | ★★★★ | ★★ |
D7176 D7178 D7180 D7182 D7185 |
BeyoRT™III M-MLV反转录酶(RNase H-) | 12kb | 无 | 有,小于3kb建议反转录10分钟 | 有, 42℃最佳,耐受50-55℃ | ★★★★★ | ★★★ |
D7188 D7190 |
BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶 | >3kb | 有 | 有,建议反转录5-10分钟 | 无,42℃最佳 | ★★ | ★★★★★ |
1. 如果反转录后的用途是qPCR,最优先推荐选购D7188 BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶。D7188 BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶和其它反转录酶相比,反转录产物用于qPCR时,CT值通常能下降1-2左右,显示BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶特别适合用于qPCR,能获得更好的检测灵敏度,可以使用更少的样品。并且使用BeyoRT™ Q M-MLV反转录酶时,仅需反转录5-10分钟,即可以用于后续的qPCR,可以大幅缩短实验时间。对于待检测的目的RNA的丰度比较高的时候,可以适当优先考虑BeyoRT™III M-MLV反转录酶(RNase H-),通常仅需反转录10分钟即可用于qPCR,也可以大幅缩短实验时间。
2. 如果希望克隆一个目的基因,最优先推荐BeyoRT™III M-MLV反转录酶(RNase H-),该酶不仅能反转录长达12kb的RNA,并且具有快速反转录能力,小于3kb的目的基因仅需反转录10分钟,可以大幅缩短实验时间。用于克隆目的基因时,BeyoRT™II M-MLV反转录酶(RNase H-)、BeyoRT™ M-MuLV反转录酶和BeyoRT™ M-MuLV反转录酶(RNase H-)也是比较好的选择。