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抗体> 免疫与炎症> NF-κB Signaling
NF-κB p65抗体(兔多抗)
产品编号: AN365
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价格: ¥ 536.00
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AN365 NF-κB p65抗体(兔多抗) >40次 536.00元
来源 用途 交叉反应性 抗体识别位点 p65分子量
Rabbit WB, IP, IF, IHC H, M, R p65 N-terminal ~65kD

      WB,Western blot;IP,Immunoprecipitation;IF,Immunofluorescence;IHC,Immunohistochemistry.
      H,human;M,mouse;R,rat.
      本NF-κB p65抗体(NF-κB p65 antibody)为进口分装,用人工合成的人NF-κB p65氨基端(N-terminal)的一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化而得到的高纯度抗体。
      NF-κB是一种常见的转录因子,可以被炎症因子、生长因子或趋化因子等激活。常见的炎症因子(包括Interleukin-1β和TNF-α等)都可以激活NF-κB。NF-κB由两类亚基形成同源或异源二聚体。一类亚基包括p65(也称RelA)、RelB和C-Rel;另一类亚基包括p50和p52。最常见的NF-κB亚基组成形式为p65/p50或p65/p65。
      NF-κB未被激活时和IκB-α形成一个复合物,分布在细胞浆中。在炎症因子、生长因子或趋化因子等可以激活NF-κB的刺激存在的情况下,IκB-α会在Ser32和Ser36被磷酸化,随后被泛素-蛋白酶体途径降解。NF-κB和IκB-α解聚后,其核定位序列被暴露,从而被转运到细胞核内促进NF-κB依赖的基因转录。通过免疫染色检测NF-κB的主要亚基p65是否被转移到细胞核内,就可以判断NF-κB是否被激活。或者提取细胞核蛋白通过Western检测细胞核内p65是否增加,也可以判断NF-κB是否被激活。
      本NF-κB p65抗体仅识别p65,不识别RelB、C-Rel、p50和p52。
      配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
      建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):

WB IP IF IHC
1:500 1:20-50 1:200-500 1:200-500

      本抗体如果用于常规的Western检测或免疫荧光染色,至少可以检测40次。
包装清单:

产品编号 产品名称 包装
AN365-1 NF-κB p65抗体(兔多抗) 40μl
AN365-2 Western一抗稀释液 40ml
说明书 1份

保存条件:
      NF-κB p65抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
      对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
      在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
      回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
      本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
      为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

使用说明:
1.Western检测:
A.按照1:500用碧云天提供的Western一抗稀释液稀释抗体。
B.把经过封闭的蛋白膜与稀释好的一抗4℃缓慢摇动过夜,确保稀释的抗体至少能在摇动的瞬间覆盖蛋白膜。
C.回收稀释的一抗,4℃保存以备下次继续使用。
D.按照Western的实验步骤进行后续的洗涤、二抗孵育、洗涤和检测等操作。具体操作可以参考如下网页:
http://www.beyotime.com/support/western.htm
2.免疫染色:
可以使用碧云天生产的免疫染色一抗稀释液(P0103)稀释抗体,使用后注意回收稀释好的一抗,具体操作可以参考如下网页: http://www.beyotime.com/support/immunol-staining.htm
3.其它实验操作请自行参考适当的protocol进行。
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