产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
C0048S | Super-Enhanced Cell Counting Kit-8 (超强型CCK-8试剂盒) | 100次 | 146.00元 |
C0048M | Super-Enhanced Cell Counting Kit-8 (超强型CCK-8试剂盒) | 500次 | 558.00元 |
C0048L | Super-Enhanced Cell Counting Kit-8 (超强型CCK-8试剂盒) | 2500次 | 1818.00元 |
C0048XL | Super-Enhanced Cell Counting Kit-8 (超强型CCK-8试剂盒) | 10000次 | 5788.00元 |
碧云天研发生产的Super-Enhanced Cell Counting Kit-8,简称Super-Enhanced CCK-8试剂盒或超强型CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8用于细胞活力、增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度检测的试剂盒。本试剂盒仅需0.5至1小时即可完成检测,和普通或增强型CCK-8试剂盒相比,检测速度更快、灵敏度更高、线性范围更宽。本试剂盒适用于在450nm左右测定吸光度。
WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan (参考图1)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系[1]。本试剂盒经过多方面的反复优化,通过测定formazan的吸光度就可以非常高效、线性、准确地测定细胞活力。
图1.碧云天Super-Enhanced Cell Counting Kit-8 (超强型CCK-8试剂盒) (C0048)检测原理图 (EC=Electron coupling reagent,即电子耦合试剂)。
WST-8是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。首先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-8和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-8产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比线性范围更宽,灵敏度更高[2]。
WST-8和WST-1相比,检测灵敏度更高,更易溶解,并且更加稳定。
本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测。
本试剂盒经过优化,大大缩短了孵育时间,一般仅需0.5-1小时即可完成检测。大多数情况下,超强型CCK-8溶液加入细胞后仅需孵育0.5-1小时就可以获得理想的信号值,但不同的细胞类型和细胞密度等实验条件下,所需的孵育时间可能存在一定的差别。本试剂盒与增强型CCK-8试剂盒(C0041)用于HeLa细胞活性检测效果的对比图参见图2,检测试剂加入后仅需孵育0.5小时,5万个HeLa的信号强度即可以达到约3.5,信号强度是增强型CCK-8试剂盒的3倍左右。
图2.碧云天Super-Enhanced Cell Counting Kit-8 (超强型CCK-8试剂盒) (C0048)和Enhanced Cell Counting Kit-8 (增强型CCK-8试剂盒) (C0041-C0046)对不同数量HeLa细胞的检测效果对比图。不同数量的HeLa细胞100μl每孔接种于透明96孔板,培养2.5小时后每孔分别加入本产品和增强型CCK-8溶液各10μl,孵育0.5小时后测定A450,在5万个细胞内信号强度与细胞数之间呈现出良好的线性关系,细胞数量超过5万、或者孵育时间超过0.5小时后可能会不呈现线性关系,但信号值还是会继续升高的。实测数据会因具体实验条件的不同而存在差异,图中数据仅供参考。
本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的超强型CCK-8溶液,无须再进行任何配制等操作。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外的步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。
酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。
本产品对细胞无明显毒性。加入超强型CCK-8溶液显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到最佳测定时间。
碧云天同时提供一系列CellTiter-Lumi™发光法细胞活力检测试剂盒,该类试剂盒是通过化学发光法测定细胞内ATP含量从而用于超快速、超高灵敏度、高信号稳定性定量检测细胞总体活性,通常10分钟内就可以完成一个96孔板的超灵敏检测。
碧云天各种细胞增殖和细胞毒性检测试剂盒的比较和选择,请参考http://www.beyotime.com/support/cell-proliferation.htm。
按照96孔板每孔100μl细胞需要10μl超强型CCK-8溶液,本试剂盒每1ml可以进行100次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
C0048S | 超强型CCK-8溶液 | 1ml |
C0048M | 超强型CCK-8溶液 | 5ml |
C0048L | 超强型CCK-8溶液 | 25ml |
C0048XL | 超强型CCK-8溶液 | 100ml |
- | 说明书 | 1份 |
-20℃避光保存,一年有效。4℃避光保存,至少2周内有效。
注意事项:本试剂盒反复冻融会降低检测效果。尽管经测试本试剂反复冻融3次对于其检测效果无显著影响,为取得良好的使用效果,第一次解冻后可适当分装保存。反复冻融过程中,可能会出现少量沉淀,此时宜平衡至室温,并尽量溶解。如果预计在2周内能使用完毕,解冻后也可以保存在4℃。
大多数情况下,超强型CCK-8溶液加入细胞后仅需孵育0.5-1小时就可以获得理想的信号值,但不同的细胞类型和细胞密度等实验条件下,所需的孵育时间可能存在一定的差别。
温度的高低会影响信号强度和信号稳定性,反应前细胞和超强型CCK-8溶液均需平衡至室温后再进行测定,可将超强型CCK-8溶液在不超过25ºC的室温或20-25ºC的水浴中融解并混匀后使用。
由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发问题。一方面,由于96孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加相同量的PBS、水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应,所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测,如果待检测体系中存在较多的还原剂,需设法去除。
用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡,否则会干扰测定。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。