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细胞相关> 细胞组织培养> 细胞组织消化
产品编号: C5519-100ml
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
C5519-100ml BeyoOrganoid™类器官分离回收液 100ml 399.00元

碧云天的BeyoOrganoid™类器官分离回收液(BeyoOrganoid™ Cell Recovery Solution for Organoid),是一种即用型非蛋白酶型类器官分离回收液,可在不破坏类器官三维(Three-dimensional, 3D)结构和生理功能的前提下,温和而快速地从培养基质胶中分离出类器官。本产品为碧云天BeyoOrganoid™系列类器官培养液的配套试剂。

类器官(Organoid)通常指在体外显示出与体内器官或组织相似结构和功能的复杂3D结构[1],更严格的定义是指由干细胞或器官祖细胞发育而来的,作为体外平台模拟其对应器官的结构和功能等多个方面的3D细胞培养物[2]。类器官在形成过程中,细胞自我组建(Self-organize)并分化为功能型的微小细胞团,模拟真实器官发育,以与体内相似的方式由细胞分序(Cell sorting out)与空间特异性的谱系分化(Spatially restricted lineage commitment)调控,需激活由细胞内在成分和外在环境(细胞外基质、培养液等)介导的各种信号通路[3]。

本产品温和、高效。本产品不含蛋白酶,故不会对细胞表面蛋白造成降解,可避免类器官回收造成的细胞损伤和功能改变;本产品可快速解开凝固状态基质胶中蛋白质大分子间的交联,温和地从培养基质胶中分离出类器官。碧云天同时提供可把类器官消化成单细胞或寡细胞团的BeyoOrganoid™类器官传代消化液(C5503/C5513)。

本产品性质稳定,品质高,有助于后续实验的进行。本产品经0.22μm无菌过滤,支原体检测呈阴性,pH值为中性,在提高了类器官回收率和完整性的同时,也维持了良好的细胞活率,有利于后续的培养、传代、冻存、成像、病毒感染以及其它相关的生化实验的进行。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
C5519-100ml BeyoOrganoid™类器官分离回收液 100ml
说明书 1份
保存条件:

-20ºC保存,一年有效。4ºC保存,2个月有效。

注意事项:

本产品为无色透明澄清的溶液,若出现浑浊,请勿继续使用。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
本步骤以24孔板为例,全程操作在冰上进行。
1.使用前,若本产品储存于-20ºC,请提前置于4ºC解冻。
2.取出培养类器官的24孔板,置于冰上,弃培养液。注:使用移液器吸取过程中,不要将类器官基质胶悬滴吸起。
3.加入与培养液等体积的预冷的PBS (C0221A),清洗3次,弃PBS。注:使用移液器吸取过程中,不要将类器官基质胶悬滴吸起。
4.按照每孔500μl向孔板内加入BeyoOrganoid™类器官分离回收液。
5.将类器官基质胶悬滴与孔板内溶液一起转移至新的无菌15ml离心管中。
6.(可选)按照每孔500μl向孔板内再次加入BeyoOrganoid™类器官分离回收液,清洗孔板,并将孔板内溶液一起转移至步骤5的离心管中。
7.将离心管颠倒混匀数次后,置于4ºC冰浴中孵育30-60分钟,直至观察到基质胶完全溶解。在孵育过程中,可晃动离心管以加快基质胶溶解。注:溶解过程,类器官会沉淀到离心管底部,不要使用移液器吸取,避免损伤类器官细胞结构。
8.4ºC,100×g,离心3-5分钟。
9.弃上清,加入2ml预冷的PBS清洗。
10.4ºC,100×g,离心3-5分钟。
11.重复步骤9和10一次。
12.弃上清,离心管中即为去除基质胶分离回收的类器官,可用于后续实验。
参考文献:
1.Rossi G, Manfrin A, Lutolf MP. Nat Rev Genet. 2018. 19(11):671-687.
2.Gu Y, Zhang W, Wu X, Zhang Y, Xu K, et al. Clin Transl Med. 2023. 13(12):e1499.
3.Corrò C, Novellasdemunt L, Li VSW. Am J Physiol Cell Physiol. 2020. 319(1):C151-C165.
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