微信在线咨询
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D0064S | 石蜡包埋组织基因组DNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 | 378.00元 |
碧云天研发生产的石蜡包埋组织基因组DNA抽提试剂盒(离心柱式) (Paraffin-embedded Tissue Genomic DNA Purification Spin Kit)，也称石蜡包埋组织基因组DNA提取试剂盒、包埋组织DNA抽提试剂盒、FFPE组织基因组DNA抽提试剂盒等，是一种采用环保脱蜡方式去除石蜡后抽提DNA的试剂盒。抽提获得的DNA可以应用于PCR、qPCR或基因组学研究等下游实验。
福尔马林固定石蜡包埋(Formalin fixation and paraffin embedding, FFPE)，常应用于癌症等疾病研究中保存离体组织的形态学和组织学结构，以便于运输和储存，是病理样品长期保存的主要方法之一[1]。组织样品经福尔马林固定时，组织内细胞中的核酸和蛋白质等分子间随机交联，核酸出现片段化，因此难以获得高质量核酸。本试剂盒采用环保脱蜡法去除石蜡，以特殊的裂解条件释放FFPE组织样本中的DNA分子，最大程度地降低了福尔马林固定时组织内细胞中DNA与其它分子交联的不利影响，经本试剂盒抽提获得的DNA纯度高、完整性好、质量稳定。
本试剂盒抽提DNA的实验流程如图1所示。首先使用环保的脱蜡剂和蛋白酶K将FFPE样品脱蜡、消化，随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液，然后加入到纯化柱内。通过高速离心，使DNA在穿过纯化柱的瞬间，结合到纯化柱上，随后通过三次洗涤去除各种杂质，最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。
图1.碧云天石蜡包埋组织基因组DNA抽提试剂盒(离心柱式) (D0064)的实验流程图。
本试剂盒抽提获得的石蜡包埋组织样品基因组DNA纯度高。本试剂盒提供的纯化柱对于DNA的最大容量约为30μg，抽提获得的DNA A260/A280的范围通常在1.6-1.9之间。本试剂盒与常见的T品牌同类产品的抽提效果对比图参见图2。
图2.碧云天石蜡包埋组织基因组DNA抽提试剂盒(离心柱式) (D0064)与T品牌同类产品(Competitor T)的DNA抽提效果对比图。样品为小鼠肾脏和肝脏组织石蜡切片，样品用量为5片10μm厚切片。抽提后洗脱体积均为50μl，取10μl的洗脱样品与2μl BeyoRed DNA上样缓冲液(6X) (D0072)混合均匀后，在1%琼脂糖凝胶中电泳30分钟后拍照。如图所示，本试剂盒用于抽提小鼠肾脏、肝脏FFPE样品的DNA时，抽提得到的DNA的量与T品牌的同款试剂盒基本一致或略好。注：抽提得到的基因组DNA经RNase A处理。实际结果会因样品、实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
本试剂盒使用安全、高效。本试剂盒通过特殊的柱纯化介质进行DNA分离纯化，能有效避免常规方法抽提DNA时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂。
本试剂盒操作快速、便捷。本试剂盒采用柱纯化，无需繁琐的DNA沉淀步骤，纯化DNA操作过程仅需约15分钟即可完成。和国外同类柱纯化产品相比，所需操作步骤和操作时间基本一致。碧云天同时提供更加便捷的BeyoMag™石蜡包埋组织基因组DNA抽提试剂盒(磁珠法) (D0089)。
本试剂盒的标准操作步骤抽提得到的总DNA含有少量RNA，但如果按照可选步骤加入RNase A，就可以获得不含RNA的高纯度总DNA。
本试剂盒小包装可用于50个样品的总DNA抽提。
包装清单：| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D0064S-1 | 脱蜡剂 | 50ml |
| D0064S-2 | 样品裂解液A | 10ml |
| D0064S-3 | 样品裂解液B | 11ml |
| D0064S-4 | 洗涤液I (首次使用前加17ml无水乙醇) | 13ml (+17ml) |
| D0064S-5 | 洗涤液II (首次使用前加39ml无水乙醇) | 26ml (+39ml) |
| D0064S-6 | 洗脱液 | 11ml |
| D0064S-7 | 蛋白酶K | 1.1ml |
| D0064S-8 | DNA纯化柱及废液收集管 | 50套 |
| — | 说明书 | 1份 |
蛋白酶K -20ºC保存，其余均室温保存，一年有效。蛋白酶K室温(15-25ºC)存放一周，活力无明显下降。
注意事项：如果希望获得更高质量的DNA，宜尽量使用新鲜固定和包埋的组织样品。拿到组织样品后尽快在4-10%福尔马林中固定，固定时间最好在8-24小时之间或更短时间，长时间固定会使DNA断裂更为严重。
样品包埋前应确保彻底脱水，残留的甲醛可能抑制蛋白酶K的消化等相关实验步骤。
本试剂盒抽提DNA依赖于样品类型、储存时间以及固定条件。样品固定时间和保存时间过长(＞1年)易破坏DNA完整性，无法抽提出长片段。
如需制备不含RNA的高纯度总DNA，需自备RNase A，推荐使用碧云天的RNase A (100mg/ml, DNase free) (ST577)。
温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生，属正常现象。使用前必须检查一遍，如有沉淀，55ºC水浴孵育使沉淀溶解，混匀后使用。
第一次使用前小包装洗涤液I需添加17ml无水乙醇，洗涤液II需添加39ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
本试剂盒须将FFPE样品56ºC和90ºC孵育，推荐使用碧云天的BeyoBath™干式恒温金属浴(1.5/2ml×40) (E6662)。
使用本试剂盒须提前备好无水乙醇。
除特别说明外，每次Vortex应控制在5-10秒左右，推荐使用碧云天的BeyoVortex™调速式涡旋混匀仪(E6699)或BeyoVortex™基础型涡旋混匀仪(E6788)。
本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D0061 | 哺乳动物基因组DNA抽提试剂盒 | 50次 |
| D0063 | 基因组DNA小量抽提试剂盒(通用型，离心柱式) | 50次 |
| D0064S | 石蜡包埋组织基因组DNA抽提试剂盒(离心柱式) | 50次 |
| D0065 | 动物基因组DNA快速抽提试剂盒(PCR分析用) | 100次/500次 |
| D0072 | BeyoRed DNA上样缓冲液(6X) | 2ml |
| D0085 | BeyoMag™磁珠法Cell-free DNA抽提试剂盒 | 50次/200次 |
| D0088S | BeyoMag™基因组DNA小量抽提试剂盒(通用型, 磁珠法) | 50次 |
| D0089S | BeyoMag™石蜡包埋组织基因组DNA抽提试剂盒(磁珠法) | 50次 |
| D0091 | BeyoMag™磁珠法血液基因组DNA抽提试剂盒 | 50次/200次/800次 |
| FTUB306 | BeyoGold™ 1.5毫升离心管(无色, Nuclease free) | 500个/盒，10盒/箱 |
| ST478-500ml | PBS, pH7.4 (DNase, RNase & Protease free, Sterile) | 500ml |
| ST533 | Proteinase K (20mg/ml) | 0.2ml/1ml/5ml |
| ST535 | Proteinase K | 100mg/500mg/2g |
| ST576 | RNase A (10mg/ml, DNase free) | 1ml |
| ST577 | RNase A (100mg/ml, DNase free) | 0.5ml |
微信在线咨询
