产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D2713-1μg | pCMV-N-mOrange2 (橙色荧光蛋白) | 1μg | 888.00元 |
D2713-100μg | pCMV-N-mOrange2 (橙色荧光蛋白) | 100μg | 1169.00元 |
pCMV-N-mOrange2是碧云天自行研发的哺乳动物细胞表达质粒,用于表达N端含mOrange2标签的融合蛋白。mOrange2蛋白是一种极其明亮的桔色荧光蛋白,与mOrange蛋白相比,其蛋白稳定性得以提高。
该质粒含有CMV启动子,可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个mOrange2的完整编码序列,并且在mOrange2前面加入Kozak序列,因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有mOrange2标签的融合蛋白。利用mOrange2的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位,也可以利用mOrange2抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。mOrange2与GFP没有序列同源性,不能使用GFP抗体检测mOrange2,但可以尝试使用抗mcherry的抗体检测mOrange2。
该质粒为卡那霉素抗性,并含有Neomycin筛选标记,转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-N-mOrange2质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide | Position |
CMV promoter | 1-602 |
T3 promoter and T3 primer binding site | 620-639 |
Kozak sepuence | 671-676 |
mOrang | 677-1381 |
Multiple cloning site | 1382-1447 |
T7 promoter and T7 primer binding site | 1491-1512 |
SV40 polyA signal | 1524-1907 |
f1 origin of ss-DNA replication | 2045-2349 |
bla promoter | 2374-2498 |
SV40 promoter | 2518-2856 |
Neomycin/kanamycin resistance ORF | 2891-3682 |
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal | 3683-4141 |
pUC origin | 4270-4937 |
pCMV-N-mOrange2质粒(4989bp)的图谱如下:
pCMV-N-mOrange2质粒的详细图谱见说明书:https://www.beyotime.com/Manual/D2713 pCMV-N-mOrange2.pdf。
pCMV-N-mOrange2中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-N-mOrange2)包括:
AclI | AhdI | AleI | AscI | AsiSI | BbsI | BbvCI | BcgI |
BlpI | BmgBI | Bpu10I | BsiWI | BsmBI | BspEI | BspQI | BsrGI |
BssHII | BstXI | BstZ17I | EarI | EcoNI | Esp3I | FseI | NotI |
NruI | PmeI | PmlI | PpuMI | PshAI | PspXI | SacII | SapI |
SbfI | ScaI | SgrAI | SmaI | SrfI | SwaI | TspMI | XcmI |
XmaI |
pCMV-N-mOrange2中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-N-mOrange2 once)包括:
AccI | GT`MK,AC | 1413 | HindIII | A`AGCT,T | 1388 |
AfeI | AGC|GCT | 660 | HpaI | GTT|AAC | 1784 |
AflII | C`TTAA,G | 1187 | KasI | G`GCGC,C | 3018 |
AgeI | A`CCGG,T | 664 | MfeI | C`AATT,G | 1771 |
ApaI | G,GGCC`C | 1446 | MluI | A`CGCG,T | 1907 |
ApaLI | G`TGCA,C | 4623 | MscI | TGG|CCA | 3101 |
AvaI | C`YCGR,G | 1424 | NarI | GG`CG,CC | 3019 |
BaeI | ,N)5`(N)10ACNNNNGTAYC(N)7,(N)5` | 1121 | NheI | G`CTAG,C | 597 |
BamHI | G`GATC,C | 1382 | PaeR7I | C`TCGA,G | 1424 |
BclI | T`GATC,A | 1678 | PciI | A`CATGT | 4937 |
BglII | A`GATC,T | 1418 | PflFI | GACN`N,NGTC | 3137 |
BmtI | G,CTAG`C | 601 | PflMI | CCAN,NNN`NTGG | 1082 |
BsaI | GGTCTCN`NNNN, | 4008 | PluTI | G,GCGC`C | 3022 |
BsaXI | ,NNN`(N)9AC(N)5CTCC(N)7,NNN` | 2071 | PspOMI | G`GGCC,C | 1442 |
BseRI | GAGGAG(N)8,NN` | 2837 | PstI | C`TGCA,G | 1398 |
BsgI | GTGCAG(N)14,NN` | 1356 | PvuI | CG,AT`CG | 1524 |
BsoBI | C`YCGR,G | 1424 | RsrII | CG`GWC,CG | 3535 |
BspDI | AT`CG,AT | 2859 | SacI | G,AGCT`C | 3505 |
BstBI | GCAGTG,NN` | 3701 | SalI | G`TCGA,C | 1412 |
BstEII | G`GTNAC,C | 829 | SfiI | GGCCN,NNN`NGGCC | 2794 |
BtsI | GCAGTG,NN` | 1860 | SfoI | GGC|GCC | 3020 |
ClaI | AT`CG,AT | 2859 | SnaBI | TAC|GTA | 346 |
CspCI | ,NN`(N)11CAA(N)5GTGG(N)10,NN` | 382 | SpeI | A`CTAG,T | 1436 |
DraIII | CAC,NNN`GTG | 2137 | StuI | AGG|CCT | 2840 |
EagI | C`GGCC,G | 2925 | Tth111I | GACN`N,NGTC | 3137 |
Eco53kI | GAG|CTC | 653 | XbaI | T`CTAG,A | 1430 |
EcoRI | G`AATT,C | 1400 | XhoI | C`TCGA,G | 1424 |
EcoRV | GAT|ATC | 1408 | XmnI | GAANN|NNTTC | 807 |
pCMV-N-mOrange2质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
N-mOrange2 primer (1284-1303): 5'- TGGATATTACATCACACAAT-3'
T7 primer (1491-1512): 5'- GTAATACGACTCACTATAGGGC -3'
pCMV-N-mOrange2的全序列信息:D2713序列信息.txt
pCMV-N-mOrange2质粒转染细胞后的表达效果请参考图1。
图1. pCMV-N-mOrange2质粒转染HEK293T细胞后的表达效果图。左侧为明场照片,右侧为荧光照片。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2713-1µg | pCMV-N-mOrange2 (橙色荧光蛋白) | 1μg |
D2713-100µg | pCMV-N-mOrange2 (橙色荧光蛋白) | 100µg |
— | 说明书 | 1份 |
-20℃保存。
注意事项:本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D2602-1µg | pCMV-Blank | 1µg |
D2602-100µg | pCMV-Blank | 100µg |
D2621-1µg | pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白) | 1µg |
D2621-100µg | pCMV-C-BFP (蓝色荧光蛋白) | 100µg |
D2623-1µg | pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) | 1µg |
D2623-100µg | pCMV-C-CFP (青色荧光蛋白) | 100µg |
D2624-1µg | pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白) | 1µg |
D2624-100µg | pCMV-C-DsRed (红色荧光蛋白) | 100µg |
D2625-1µg | pCMV-C-mOrange2(橙色荧光蛋白) | 1µg |
D2625-100µg | pCMV-C-mOrange2(橙色荧光蛋白) | 100µg |
D2626-1µg | pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) | 1µg |
D2626-100µg | pCMV-C-EGFP (绿色荧光蛋白) | 100µg |
D2628-1µg | pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) | 1µg |
D2628-100µg | pCMV-C-mCherry (红色荧光蛋白) | 100µg |
D2630-1µg | pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) | 1µg |
D2630-100µg | pCMV-C-YFP (黄色荧光蛋白) | 100µg |
D2632-1µg | pCMV-C-Flag | 1µg |
D2632-100µg | pCMV-C-Flag | 100µg |
D2639-1µg | pCMV-C-HA | 1µg |
D2639-100µg | pCMV-C-HA | 100µg |
D2650-1µg | pCMV-C-His | 1µg |
D2650-100µg | pCMV-C-His | 100µg |
D2672-1µg | pCMV-C-Myc | 1µg |
D2672-100µg | pCMV-C-Myc | 100µg |
D2701-1µg | pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白) | 1µg |
D2701-100µg | pCMV-N-BFP (蓝色荧光蛋白) | 100µg |
D2703-1µg | pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) | 1µg |
D2703-100µg | pCMV-N-CFP (青色荧光蛋白) | 100µg |
D2705-1µg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 1µg |
D2705-100µg | pCMV-N-DsRed (红色荧光蛋白) | 100µg |
D2707-1µg | pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白) | 1µg |
D2707-100µg | pCMV-N-EGFP (绿色荧光蛋白) | 100µg |
D2711-1µg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 1µg |
D2711-100µg | pCMV-N-mCherry (红色荧光蛋白) | 100µg | D2716-1µg | pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白) | 1µg |
D2716-100µg | pCMV-N-YFP (黄色荧光蛋白) | 100µg |
D2722-1µg | pCMV-N-Flag | 1µg |
D2722-100µg | pCMV-N-Flag | 100µg |
D2733-1µg | pCMV-N-HA | 1µg |
D2733-100µg | pCMV-N-HA | 100µg |
D2737-1µg | pCMV-N-His | 1µg |
D2737-100µg | pCMV-N-His | 100µg |
D2756-1µg | pCMV-N-Myc | 1µg |
D2756-100µg | pCMV-N-Myc | 100µg |