微信在线咨询
| 产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
| D5733-100μl | BeyoFast™ HhaI | 100μl | 158.00元 |
碧云天生产的BeyoFast™系列快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在5-15分钟内仅使用一种缓冲液就能快速完成DNA酶切的高品质限制性内切酶。
BeyoFast™系列快速内切酶适用于质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。
BeyoFast™系列快速内切酶具有如下优点。(1) 5-15分钟内就能完成酶切；(2) 所有BeyoFast™系列内切酶共用一种酶切缓冲液CutEZ™ Buffer，大大简化酶切反应体系，方便进行双酶切或多酶切；(3) 针对不同酶在CutEZ™ Buffer中活性存在差异的问题，调整了不同酶的浓度，可以统一按照每20μl体系加入1μl酶量的用量进行酶切反应；(4) Alkaline Phosphatase、Antarctic Phosphatase、T4 DNA Ligase、T4 Polynucleotide Kinase、T4 PNK (3' phosphatase minus)等很多修饰酶等都100%兼容CutEZ™ Buffer (具体的兼容性表请参考https://www.beyotime.com/product/D6018.htm)，使“酶切-连接”和“酶切-修饰-连接”等反应体系可以兼容，支持一管化反应；(5)良好的酶活冗余度，轻松应对底物过量或困难模板酶切。
酶活性检测：最适反应温度下，在20μl反应体系中，1μl BeyoFast™ HhaI能够在15min内完全消化1μg λDNA。
图1. 碧云天生产的BeyoFast™ HhaI (D5733)酶活性实测效果图。20μl反应体系中包含1μg λDNA (48502bp)，以及如图所示不添加或添加1µl BeyoFast™ HhaI，分别使用1X CutEZ™ Buffer和1X Easy-Load™ CutEZ™ Buffer，37ºC孵育15分钟进行酶切反应，65ºC孵育20分钟使酶失活，然后电泳并使用NA-Red (EB升级换代产品, 2000X) (D0128/D0130)进行核酸染色，再进行荧光成像分析。所使用的DNA marker为DNA Ladder (0.2-12 kb, 12 bands) (D0110)。实际检测效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，图中效果仅供参考。
长时间酶切检测：最适反应温度下，将1μl BeyoFast™ HhaI与1μg λDNA共同温育3h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，延时酶切可能出现星号活性。
酶切-连接-再酶切检测：最适反应温度下，使用1μl BeyoFast™ HhaI消化底物，回收酶切产物，在22ºC下使用适量T4 DNA Ligase可以将酶切产物重新连接，将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
非特异性内切酶活性检测：最适反应温度下，将1μl BeyoFast™ HhaI与1μg超螺旋质粒DNA共同温育4h，使用琼脂糖凝胶电泳检测，质粒DNA仍然处于超螺旋状态。
蓝白斑检测：将含有单一lacZα基因的载体以1μl BeyoFast™ HhaI消化，重新连接后转化入大肠杆菌感受态细胞，涂布在含有对应抗生素、IPTG和X-gal的LB培养基平板上。连接正确的产物会生长出蓝色菌落，而连接错误(即DNA末端切口不完整)的产物将得到白色菌落。对于BeyoFast™系列限制酶而言，白色菌落比例应小于1%。
BeyoFast™ HhaI快速内切酶基本信息如下：
| 识别序列[1] | 同裂酶 | 酶切温度 | 失活条件 | 甲基化干扰？ |
| 5'-GCG^C-3' 3'-C^GCG-5' |
AspLEI, BstHHI, CfoI, Hin6I, HinP1I, HspAI | 37ºC | 65ºC 20min | 有时有干扰 |
BeyoFast™ HhaI快速内切酶在不同反应缓冲液中的活性(缓冲液兼容性)如下:
| Beyotime CutEZ™ Buffer | Beyotime Easy-Load™ CutEZ™ Buffer | Thermo FastDigest Buffer | NEB CutSmart® Buffer | Takara QuickCut™ Buffer |
| 100% | 100% | 100% | 100% | 100% |
注：活性数据来自碧云天BeyoFast™系列快速内切酶的标准反应体系下的检测。
BeyoFast™ HhaI快速内切酶识别位点的甲基化影响请参考下表：
| Dam | Dcm | CpG | EcoKI | EcoBI |
| 无影响 | 无影响 | 序列完全重叠，剪切阻断 | 无影响 | 无影响 |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D5733-100μl | BeyoFast™ HhaI | 100μl |
| D6018-1ml | 10X CutEZ™ Buffer | 1ml |
| D6020-1ml | Easy-Load™ 10X CutEZ™ Buffer | 1ml |
| - | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存，两年有效。
注意事项：内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20ºC保存。
不含核酸酶的超纯水推荐选购碧云天的BeyoPure™ Ultrapure Water (DNase/RNase-Free, Sterile) (ST876)。
如果发现预期的酶切位点不能切开，请确认是否存在甲基化干扰问题。
同裂酶对于不同的甲基化修饰可能具有不同敏感性，遇到可能存在甲基化干扰问题时，可以尝试同裂酶。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
| Reagent | Plasmid DNA | PCR Product | Genomic DNA |
| Ultrapure Water | (17-x)µl | (26-x)µl | (40-x)µl |
| 10X CutEZ™ Buffer or Easy-Load™ 10X CutEZ™ Buffer |
2µl | 3µl | 5µl |
| Substrate DNA | xµl (up to 1µg) | xµl (~0.2µg) | xµl (5µg) |
| BeyoFast™ HhaI | 1µl | 1µl | 5µl |
| Total volume | 20µl | 30µl | 50µl |
| Incubate at 37ºC | 15min | 15-30min | 30-60min |
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| D5601-200μl | BeyoFast™ ApaLI | 200μl |
| D5609-50μl | BeyoFast™ AscI | 50μl |
| D5617-25μl | BeyoFast™ AvrII | 25μl |
| D5625-500μl | BeyoFast™ BamHI | 500μl |
| D5633-125μl | BeyoFast™ BclI | 125μl |
| D5641-100μl | BeyoFast™ BglII | 100μl |
| D5649-50μl | BeyoFast™ BsaI | 50μl |
| D5653-20μl | BeyoFast™ BspQI | 20μl |
| D5655-20μl | BeyoFast™ Nt.BspQI | 20μl |
| D5657-100μl | BeyoFast™ BstBI | 100μl |
| D5665-100μl | BeyoFast™ BstEII | 100μl |
| D5670-100μl | BeyoFast™ Cfr9I | 100μl |
| D5673-50μl | BeyoFast™ ClaI | 50μl |
| D5681-50μl | BeyoFast™ DpnI | 50μl |
| D5689-50μl | BeyoFast™ DpnII | 50μl |
| D5692-200μl | BeyoFast™ DraI | 200μl |
| D5697-25μl | BeyoFast™ EagI | 25μl |
| D5699-20μl | BeyoFast™ EarI | 20μl |
| D5705-600μl | BeyoFast™ EcoRI | 600μl |
| D5713-200μl | BeyoFast™ EcoRV | 200μl |
| D5721-30μl | BeyoFast™ Esp3I (BsmBI ) | 30μl |
| D5729-50μl | BeyoFast™ FspI | 50μl |
| D5733-100μl | BeyoFast™ HhaI | 100μl |
| D5737-500μl | BeyoFast™ HindIII | 500μl |
| D5745-500μl | BeyoFast™ HinfI | 500μl |
| D5753-50μl | BeyoFast™ HpaI | 50μl |
| D5755-100μl | BeyoFast™ HpaII | 100μl |
| D5761-30μl | BeyoFast™ KasI | 30μl |
| D5769-200μl | BeyoFast™ KpnI | 200μl |
| D5773-50μl | BeyoFast™ MboI | 50μl |
| D5777-100μl | BeyoFast™ MluI | 100μl |
| D5785-50μl | BeyoFast™ MnlI | 50μl |
| D5787-20μl | BeyoFast™ MseI | 20μl |
| D5789-200μl | BeyoFast™ MspI | 200μl |
| D5793-30μl | BeyoFast™ NcoI | 30μl |
| D5801-200μl | BeyoFast™ NdeI | 200μl |
| D5809-30μl | BeyoFast™ NheI | 30μl |
| D5817-50μl | BeyoFast™ NotI | 50μl |
| D5825-50μl | BeyoFast™ NruI | 50μl |
| D5833-25μl | BeyoFast™ NsiI | 25μl |
| D5841-25μl | BeyoFast™ PacI | 25μl |
| D5847-50μl | BeyoFast™ PmeI | 50μl |
| D5849-500μl | BeyoFast™ PstI | 500μl |
| D5857-200μl | BeyoFast™ PvuII | 200μl |
| D5865-100μl | BeyoFast™ SacI | 100μl |
| D5873-50μl | BeyoFast™ SacII | 50μl |
| D5881-200μl | BeyoFast™ SalI | 200μl |
| D5885-20μl | BeyoFast™ SapI | 20μl |
| D5889-25μl | BeyoFast™ SbfI | 25μl |
| D5893-100μl | BeyoFast™ ScaI | 100μl |
| D5897-100μl | BeyoFast™ SfiI | 100μl |
| D5905-100μl | BeyoFast™ SmaI | 100μl |
| D5913-50μl | BeyoFast™ SpeI | 50μl |
| D5921-50μl | BeyoFast™ SphI | 50μl |
| D5929-60μl | BeyoFast™ SspI | 60μl |
| D5937-100μl | BeyoFast™ StuI | 100μl |
| D5945-200μl | BeyoFast™ TaqI | 200μl |
| D5953-500μl | BeyoFast™ XbaI | 500μl |
| D5958-50μl | BeyoFast™ XcmI | 50μl |
| D5961-500μl | BeyoFast™ XhoI | 500μl |
| D5966-100μl | BeyoFast™ XmaI | 100μl |
微信在线咨询
