产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D7025S | Recombinant E.coli RecA Protein | 200μg | 386.00元 |
D7025M | Recombinant E.coli RecA Protein | 1mg | 1528.00元 |
碧云天生产的Recombinant E.coli RecA Protein,即重组大肠杆菌RecA蛋白,也称E.coli RecA,是碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的一种大肠杆菌内源性表达的对于DNA损伤修复和紫外诱导的突变过程中的遗传重组起关键作用的酶。RecA的合成是由DNA损伤导致的SOS反应诱导的。RecA具有单链DNA依赖的ATP酶活性,在同源重组反应的过程中,会形成D-loop和Holliday structure;它还具有coprotease活性,并促进LexA抑制子、lambda噬菌体抑制子和UmuD蛋白的自剪切。RecA在真核生物中的同源蛋白是Rad51和Dmc1[1]。E.coli RecA蛋白可用于重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification, RPA)[2]。
体外研究所必需的表明,在ATP存在的情况下,E.coli RecA蛋白首先与单链DNA结合形成核蛋白丝,核蛋白丝与双链DNA结合形成突触丝,突触丝打开双链体并寻找同源链,之后催化互补链的交换,结合E.coli RecA蛋白的单链DNA与互补链DNA从5′→3′方向进行互补配对最终形成新的异源双链体并发生分叉迁移[3]。
用途:电镜下DNA结构的可视化,D-loop突变,利用E.coli RecA蛋白结合的探针进行DNA文库筛选,在单个指定位点进行DNA酶切,介导全长cDNA克隆的亲和捕获,同源重组机制及SOS反应研究,重组酶聚合酶扩增。
来源:纯化自携带recA基因的E.coli重组菌株。
分子量:约为38kDa。
纯度:纯度≥ 95%,且不含DNA内切酶和外切酶、不含RNA酶、不含磷酸酯酶。
浓度:2mg/ml。
酶储存溶液:10 mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 1mM DTT, 50% (v/v) Glycerol, pH7.4 @ 25ºC。
10X RecA Reaction Buffer:700mM Tris-HCl, 100mM MgCl2, 50mM DTT, pH7.6 @ 25ºC。
失活或抑制:65ºC孵育20分钟可使E.coli RecA蛋白失活。
碧云天E.coli RecA蛋白酶活性检测效果参考图1。
图1.碧云天Recombinant E.coli RecA Protein (D7025)活性鉴定结果图。在10µl反应体系中,加入1µl 10X RecA Reaction Buffer、图中指定量的本产品(0-5μg)及5pmol ssDNA (25bp),随后用超纯水补足至10μl,37ºC孵育30分钟进行充分结合。结合完成后,取10μl反应后产物,加入1µl EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(蓝色, 10X) (GS007)混匀,使用BeyoGel™ EMSA PAGE预制胶(4%, 15孔) (GS306S)进行电泳检测。电泳结束后,在室温下使用NA-Red (EB升级换代产品, 2000X) (D0128/D0130)染色凝胶20-30分钟,紫外灯下拍照观察实验结果。如图所示,本产品与N公司(Competitor)有相似的单链DNA结合活性。实际效果会因样品种类、检测仪器等的不同而存在差异,图中效果仅供参考。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7025S-1 | Recombinant E.coli RecA Protein (2µg/µl) | 100µl |
D7025S-2 | 10X RecA Reaction Buffer | 0.2ml |
— | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7025M-1 | Recombinant E.coli RecA Protein (2µg/µl) | 500µl |
D7025M-2 | 10X RecA Reaction Buffer | 1ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,两年有效。
注意事项:本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Reagent | Volume |
Ultrapure Water | xµl |
10X RecA Reaction Buffer | 1µl |
ssDNA | yµl |
E.coli RecA | 1-2µl |
Total Volume | 10µl |
Reagent | Volume |
Ultrapure Water | xµl |
10X RecA Reaction Buffer | 4µl |
ssDNA (60 mer) | 0.18µg |
pUC19 | 0.5pmol |
ATP γ-S | 0.3mM |
E.coli RecA | 2µl |
Total Reaction Volume | 40µl |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7035 | Klenow Fragment | 100U |
D7037S | Klenow Fragment | 200U |
D7037M | Klenow Fragment | 1000U |
D7037L | Klenow Fragment | 5000U |
D7039 | Klenow Fragment, Exo- | 100U |
D7041S | Klenow Fragment, Exo- | 200U |
D7041M | Klenow Fragment, Exo- | 1000U |
D7041L | Klenow Fragment, Exo- | 5000U |
D7055S | Bsu DNA Polymerase, Large Fragment | 200U |
D7055M | Bsu DNA Polymerase, Large Fragment | 1000U |
D7057S | T4 Gene 32 Protein (ssDNA结合蛋白) | 100µg |
D7057M | T4 Gene 32 Protein (ssDNA结合蛋白) | 500µg |
D7057L | T4 Gene 32 Protein (ssDNA结合蛋白) | 2mg |
D7378-250μl | ATP (100mM, Nuclease free) | 250µl |
D7378-1ml | ATP (100mM, Nuclease free) | 1ml |
D7378-5ml | ATP (100mM, Nuclease free) | 5ml |
D7024S | E.coli Single-Stranded DNA Binding Protein (SSB) | 100µg |
D7024M | E.coli Single-Stranded DNA Binding Protein (SSB) | 500µg |
D7024L | E.coli Single-Stranded DNA Binding Protein (SSB) | 2mg |
D7025S | Recombinant E.coli RecA Protein | 200µg |
D7025M | Recombinant E.coli RecA Protein | 1mg |
P7415 -100µg | Recombinant SSB | 100µg |
P7415-500µg | Recombinant SSB | 500µg |