碧云天生产的BeyoMag™ Tosyl磁珠偶联试剂盒(BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads Coupling Kit)，也称Tosyl磁珠偶联试剂盒、甲苯磺酰基化磁珠偶联试剂盒、甲苯磺酰基衍生化磁珠偶联试剂盒、甲苯磺酰基衍生微珠偶联试剂盒、抗体偶联试剂盒、Tosyl Derivatized Beads Coupling Kit、Toluenesulfonyl Derivatized Beads Coupling Kit、 Tosylactivated Beads Coupling Kit、Antibody Coupling Kit或Antibody Conjugation Kit，是一类采用了高质量的BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (甲苯磺酰基磁珠)，无需活化，可快速、高效、灵敏、特异性地与多肽、蛋白、抗体、寡聚核苷酸等生物分子共价偶联的试剂盒。本试剂盒的偶联产物，后续可以用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、细胞分选、DNA-蛋白相互作用等，是医学和生命学研究中的重要载体工具。

磁分离是一种利用外部磁场对磁性材料的作用力，在保留生物活性的同时结合并分离生物分子、细胞的方法，具有吸附量大、分离速度快、效率高、可重复使用、操作简单等特点[1,2]。常规的四氧化三铁微球作为常用的磁性材料磁响应性高、生物相容性极佳，但表面未经修饰，不稳定，易发生自身的聚集和沉淀。常见的含功能基团的磁珠有Tosyl磁珠、NHS磁珠、羧基磁珠和氨基磁珠，是在磁珠的壳层结构包被有Tosyl、NHS、羧基或氨基官能团，以降低磁珠本身的聚集和沉淀；Tosyl和NHS磁珠无需活化，可以直接使用；羧基磁珠显酸性，在酸性缓冲液中通常用EDC/NHS等进行活化，而氨基磁珠显碱性，在碱性缓冲液中通常用戊二醛等进行活化。本系列试剂盒的Tosyl磁珠为甲苯磺酰基包覆的超顺磁性四氧化三铁微球的水相悬浮液，采用的先进技术使磁珠与二氧化硅或高分子材料完美结合，是一种新型功能化磁性微球。与传统磁珠相比，本系列试剂盒的Tosyl磁珠具有超顺磁性、高甲苯磺酰基密度、快速磁响应性、单分散性、分离速度快、回收率高、特异性强等多方面的优点，能便捷高效地与多种生物分子(多肽、蛋白、抗体等)进行高载量结合，也可作为良好的基础材料进行包被、吸附、化学改性等后续处理。同时，本系列试剂盒的Tosyl磁珠的二氧化硅/聚合物外壳可保护与磁珠结合的目标分子免受铁元素的负面影响。

本系列试剂盒的Tosyl磁珠与蛋白、抗体等生物分子共价偶联的基本原理如下。生物偶联是通过化学共价键结合生物分子的过程，生物偶联试剂含有具有反应活性的末端，可与特定功能基团(如伯氨基、巯基)反应。伯胺(-NH₂)存在于每条多肽链的N-末端以及赖氨酸残基的侧链中。由于伯胺带正电荷，因此它通常在蛋白质的外表面，使其更易于偶联而不会改变蛋白质结构。Tosyl磁珠无需活化，只需简单地将含伯氨基或者巯基的生物配体溶解在Coupling Buffer中，20-37ºC下将生物配体与Tosyl磁珠混合，过夜或更长时间便可将生物配体共价偶联到磁珠上。本系列试剂盒进行蛋白等生物分子偶联的流程参考图1。

图1. 碧云天BeyoMag™ Tosyl磁珠偶联试剂盒(P1632/P1635/P1640)生物分子偶联流程图(以偶联蛋白为例)。

本系列试剂盒使用便捷，提供了配套试剂。本系列试剂盒提供了Tosyl磁珠偶联反应所需的相关试剂，仅需要自备抗体等待偶联的生物分子，为生物分子的偶联带来了极大的便利。同时Tosyl磁珠储存在特殊保护液中，不含甘油，配合试剂盒提供的缓冲液，可以通过磁性吸附实现快速高效的分离纯化，无需离心操作。

本系列试剂盒的Tosyl磁珠特异性强、配基密度高、结合量大。与国内外大多数的同类产品相比，本系列试剂盒的Tosyl磁珠Tosyl密度高，对带有伯氨基或巯基的生物分子具有很强的反应特异性。本系列试剂盒的Tosyl磁珠包含200nm、500nm和1µm三种粒径可供选择，每毫升磁珠悬浊液含约10mg磁珠，可反应结合不少于0.6mg IgG抗体，具体的最大结合量和生物分子的分子量大小等相关。

本系列试剂盒的Tosyl磁珠与生物分子的反应速度快。本系列试剂盒Tosyl磁珠Tosyl密度高，Tosyl磁珠能快速地与带有伯氨基或巯基的生物分子发生偶联，无需活化，节省了操作时间。

本系列试剂盒的Tosyl磁珠分散性和重悬性良好。本系列试剂盒的Tosyl磁珠进行了二氧化硅或高分子材料修饰，避免了磁珠的聚团，使磁珠具有良好的单分散性和稳定的物理化学性质，磁珠进行生物分子偶联反应时具有很好的重复性和便捷性。

本系列试剂盒的Tosyl磁珠的主要指标请参考下表：

碧云天各种官能团、粒径磁珠和偶联试剂盒的差异及选择可以参考下表：

按每次使用100μl磁珠悬液进行偶联，本系列试剂盒小包装可使用50次。

4ºC保存，两年有效。室温保存，至少一周有效。BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads不能-20ºC或更低温度冷冻保存。

如有需要，也可单独订购碧云天的各种规格的Tosyl磁珠，如BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (200nm) (ST432)、BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (500nm) (ST435)、BeyoMag™ Tosyl Magnetic Beads (1µm) (ST438)。

本产品-20ºC或更低温度冷冻保存会导致磁珠聚团，影响后续的正常使用。

须根据生物分子的特性选择合适的功能基团及粒径的磁珠。

本系列试剂盒Tosyl磁珠需维持pH为6-8，避免高速离心、干燥；请勿长时间将磁珠置于磁场中，否则可能会引起磁珠聚团。

本系列试剂盒Tosyl磁珠使用前要适当充分重悬，即颠倒若干次使磁珠混合均匀，充分震荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。

为保证最佳的偶联效果，偶联缓冲液不能含有Tris等带伯氨基的溶液。

蛋白稳定剂(如BSA、明胶等)会抑制蛋白/抗体与Tosyl磁珠的结合，因此在Tosyl磁珠偶联蛋白/抗体时，需要确保蛋白/抗体偶联体系中不存在含伯氨基的蛋白稳定剂。配体样品溶液中也不能含有任何蛋白、糖类或者稳定剂等，这些物质会与Tosyl磁珠发生反应从而影响配体与磁珠的反应。

如果使用真空泵等仪器吸取上清液，须注意真空泵的吸液强度，以免吸力过大而吸取到聚集的磁珠。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。