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多肽与蛋白> 重组蛋白> 其它重组蛋白
Recombinant Human Rac1 (Flag-Tag)
产品编号: P2461-1mg
产品包装:1mg
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价格: ¥ 8698.00
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P2461-10μg Recombinant Human Rac1 (Flag-Tag) 10μg 369.00元
P2461-100μg Recombinant Human Rac1 (Flag-Tag) 100μg 1299.00元
P2461-1mg Recombinant Human Rac1 (Flag-Tag) 1mg 8698.00元
Species Gene ID Accession Source Length MW Tag
Human 5879 P63000 E.coli 198aa ~22kDa C-Flag Tag

蛋白信息(About this protein)
名称(Name) Recombinant Human Rac1,重组人Rac1蛋白
别名(Synonyms) RAC1, MIG5, Rac-1, TC-25, p21-Rac1, ras-related C3 botulinum toxin substrate 1 (rho family, small GTP binding protein Rac1), Rac family small GTPase 1, MRD48
产品简介
(Background)
Beyotime's recombinant human Rac1 (rhRac1) was expressed in E.coli and purified, which contains the mature form Rac1 (2-189aa) with Flag tag (DYKDDDDK) at the C-terminus.
Rac1 is involved in the regulation a diverse array of cellular events, including the control of GLUT4 translocation to glucose uptake, cell growth, cytoskeletal reorganization, antimicrobial cytotoxicity and the activation of protein kinases [1].
产品用途
(Applications)
Recombinant Human Cdc42 G12V is useful in studying Cdc42 interacting proteins, effectors, GAPs (GTPase-activating proteins) and GEFs (Guanine nucleotide-exchange factors). It can also be used as positive control in Western blot.
外观
(Physical Appearance)
Liquid
活性(Biological activity) About 0.28nmol/h/μg in GTPase activity assay.
浓度(Concentration) 1mg/ml
纯度(Purity) ≥95% by SDS-PAGE
储存液(Storage buffer) 50mM Tris pH 7.4, 0.5mM MgCl2, 50mM NaCl, 1mM DTT

图1. 小GTP酶在“激活”和“静息”状态之间循环的原理图。

小GTP酶(Small GTPase),也称Small G-proteins、Ras superfamily,是调节真核细胞信号转导、细胞增殖、细胞骨架重组和细胞内膜转运等过程的分子开关,小GTP酶通过结合和水解GTP,在“激活”和“静息”状态之间循环:在外界信号的刺激下,鸟苷酸交换因子(Guanine nucleotide-exchange factors, GEFs)辅助小GTP酶将结合的GDP置换为GTP,小GTP酶结合GTP进入激活状态(Active state);激活状态的小GTP酶与下游效应蛋白(Effector protein)相互作用,从而刺激细胞发生相应的响应;GTP酶激活蛋白(GTPase-activating proteins, GAPs)催化小GTP酶结合的GTP水解为GDP,并释放自由磷酸盐(Free phosphate, Pi),此时小GTP酶结合GDP进入静息状态(Inactive state),鸟嘌呤核苷酸解离抑制蛋白(Guanine nucleotide dissociation inhibitors, GDIs)抑制小GTP酶释放GDP,直到GEFs受到刺激信号再次开启新一轮的循环(图1) [2-3]。

小GTP酶在人类中已发现超过150个家族成员,在果蝇(Drosophila)、秀丽隐杆线虫(C. elegans)、酿酒酵母(S. cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(S. pombe)、黏菌(Dictyostelium)和植物中也都发现了保守的同源物。小GTP酶根据结构和功能被分为5个家族分支:Ras家族、Rho家族、Ran家族、Rab家族和Arf家族。Ras家族本身又被分为6个亚家族:Ras亚家族、Ral亚家族、Rit亚家族、Rap亚家族、Rheb亚家族和Rad亚家族[4]。

Rho家族(Ras homologous GTPases)在真核生物中高度保守,是调节肌动蛋白重组的关键因子,因此在细胞迁移、伤口愈合、细胞粘附、细胞极性、膜转运和细胞分裂等过程中发挥着重要作用。目前有21个成员被发现,被分为8亚家族(见下表),其中RhoA、Rac1和Cdc42研究的最为广泛[5]。

Subfamily Rho Rac Cdc42 RhoH RhoBTB RhoUV Rnd RhoF
Rho family members RhoA
RhoB
RhoC
Rac1
Rac2
Rac3
RhoG
Cdc42
RhoQ (TC10)
RhoJ (TCL)
RhoH RhoBTB1
RhoBTB2
RhoBTB3
RhoU (Wrch)
RhoV (Chp)
Rnd1
Rnd2
Rnd3 (RhoE)
RhoD
RhoF (Rif)

本产品经SDS-PAGE电泳检测蛋白纯度和分子量参考图2。

图2. 碧云天Recombinant Human Rac1 (Flag-Tag) (P2461)的SDS-PAGE电泳检测图。本蛋白经BeyoGel™ Elite PAGE预制胶(Bis-Tris, 12%, 10孔) (P0849)电泳,Marker为BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(6.5-270kD) (P0071/P0072),并经BeyoBlue™考马斯亮蓝超快染色液(P0017F)染色。实际检测结果可能会因样品和检测条件等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

本产品经GTPase Activity Assay Kit (Colorimetric) (P2435)检测GTP酶活性的效果请参考图3。

图3. 碧云天Recombinant Human Rac1 (Flag-Tag) (P2461)的GTP酶活性检测效果图。X轴为Rac1蛋白的质量(μg),Y轴为对应单位时间内释放Pi摩尔量(nmol/h),建立二元一次方程的斜率即为GTP酶活性(nmol/h/μg)。实际结果因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
P2461-10μg Recombinant Human Rac1 (Flag-Tag) (1mg/ml) 10μl
P2461-100μg Recombinant Human Rac1 (Flag-Tag) (1mg/ml) 100μl
P2461-1mg Recombinant Human Rac1 (Flag-Tag) (1mg/ml) 1ml
说明书 1份
保存条件:

-20ºC保存,一年有效。-80ºC保存,可以保存更长时间。

注意事项:

由于蛋白每次冻融均会引起部分失活,所以首次配制成相应浓度的储存液后,须分装后-20ºC或更低温度冻存,尽量避免反复冻融。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 收到产品后请立即按照说明书推荐的条件保存。在打开管盖前,请适当离心,使附着在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底。
2. 具体的最佳工作浓度请自行参考相关文献,或者根据实验目的,通过实验进行摸索和优化。
参考文献:
1. Sylow L, Nielsen IL, Kleinert M, Møller LL, Ploug T, Schjerling P, Bilan PJ, Klip A, Jensen TE, Richter EA. J Physiol. 2016. 594(17):4997-5008.
2. Vernoud V, Horton AC, Yang Z, Nielsen E. Plant Physiol. 2003. 131(3):1191-208.
3. Ito H, Morishita R, Nagata KI. Int J Mol Sci. 2018. 19(7):2121.
4. Goitre L, Trapani E, Trabalzini L, Retta SF. Methods Mol Biol. 2014. 1120:1-18.
5. Hall A. Biochem Soc Trans. 2012. 40(6):1378-82.
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