碧云天的BeyoMag™磁珠法血液RNA抽提试剂盒，即BeyoMag™ Blood RNA Isolation Kit with Magnetic Beads，是一种使用新型核酸纯化介质包被的磁珠，从血液中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提总RNA的试剂盒。抽提获得的RNA包含大分子量RNA和小RNA(<200nt)，也常被称为总RNA(Total RNA)，可以用于各种常规分子生物学和生化检测等用途。

本试剂盒抽提得到的RNA可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern、点杂交(Dot Blot)、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection assay、cDNA克隆等下游实验；也可用于基因表达芯片分析(Microarray)、高通量测序(High throughput sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。

RNA按照长度可以分为长链RNA (Long RNA)和小RNA (Small RNA)，长链RNA通常大于200nt，而小RNA通常小于200nt。长链RNA按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA (Long noncoding RNA, lncRNA)和mRNA。小RNA主要包括非编码的5.8S rRNA (Ribosomal RNA)、5S rRNA、tRNA (Transfer RNA)、microRNA (miRNA)、siRNA (Small interfering RNA)、piRNA (Piwi-associated small RNA)、tsRNA (tRNA-derived small RNA)、srRNA (Small rDNA-derived RNA)等[1]。

本试剂盒抽提RNA的基本流程如图1所示。样品在裂解液中迅速裂解，释放出总RNA，然后让RNA特异性地结合到磁珠上，再通过3次洗涤充分去除非特异性结合的蛋白、盐等杂质，最后用洗脱液将高纯度的RNA洗脱下来。

图1. BeyoMag™磁珠法血液RNA抽提试剂盒(R0093)抽提RNA流程示意图。

本试剂盒使用安全。本试剂盒通过特殊的磁珠纯化介质进行RNA分离纯化，能有效避免传统的TRIzol LS法抽提时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂。

本试剂盒使用快速、便捷。本试剂盒无需使用红细胞裂解液去除无核的红细胞，避免RNA降解；采用磁珠纯化，无需繁琐的RNA沉淀步骤，抽提操作过程仅15-20分钟。相比于传统的TRIzol LS抽提法，本试剂盒的操作流程显著简化，缩短了抽提时间，降低了RNA被降解的风险。和国外同类柱纯化产品相比，所需操作步骤和操作时间基本一致。

本试剂盒抽提得到的RNA得率高、纯度高。纯的RNA其A260/A280约为2.0，但在很多仪器上测定时会高于2.0，低于1.9通常认为有蛋白、DNA或者酚等的污染；纯的RNA其A260/A230约为2.0左右或者略高，低于1.9通常认为有碳水化合物、胍盐、多肽或酚等的污染。本试剂盒效果经反复测试，抽提得到的RNA的A260/A280通常为2.0-2.2，A260/A230通常为1.9-2.1。本产品对于小鼠血液样品的抽提效果如图2所示。

图2. BeyoMag™磁珠法血液RNA抽提试剂盒(R0093)和RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) (R0091)抽提新鲜小鼠血液RNA的效果对比。样品为100μl新鲜小鼠全血，洗脱液用量均为50μl。均取8μl洗脱的样品经与2μl BeyoRed DNA上样缓冲液(6X) (D0072)混合后，在1.2%琼脂糖凝胶中电泳约30分钟后拍照。实际抽提效果会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异，本图仅供参考。

本试剂盒适用于新鲜、冻存、经EDTA、肝素等抗凝处理或经过RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)保存的血液RNA的抽提，推荐的血液样品量为100-200μl，本试剂盒小、中和大包装可分别用于10、50和200个样品的RNA抽提。

除DNase和Reaction Buffer (10X)以外，室温保存，一年有效。DNase和Reaction Buffer (10X) -20ºC保存，一年有效。其中BeyoMag™ RNA磁珠长期不使用时，可以4ºC保存，4ºC可以保存更长时间。

首次使用前，结合液和洗涤液II按照说明书或瓶标上的指示加入相应量的无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。

需自备磁分离装置，推荐使用碧云天的1.5/2ml磁分离架(FMS004、FMS008、FMS009、FMS012、FMS016、FMS017、FMS024、FMS025)。

血液样品推荐使用RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)进行保存以保持RNA的完整性。

如果不使用试剂盒提供的DNase进行处理，本试剂盒抽提得到的RNA会含有少量的DNA。后续如进行某些对DNA残留较敏感的实验时，需要在使用说明中步骤4后，在磁珠中加入适量DNase进行消化，具体请参考使用说明。

建议使用推荐的血液量用于RNA的抽提，否则可能导致BeyoMag™ RNA磁珠聚集而使基因组DNA消化不充分。如果基因组DNA消化不充分，可以加大DNase的用量或延长孵育时间。DNase如果需要加大，可以考虑订购碧云天的RNase-free的DNase I (D7073/D7076)。

本试剂盒提供的所有试剂和耗材都是RNase-free，操作时应小心，避免被污染。所有自行准备的试剂和耗材也都应是RNase-free。如果可能有RNase污染，可考虑用0.01%的DEPC水浸泡过夜，然后高温高压灭菌并烘干。操作时应避免对着样品或所使用的试剂盒耗材呼气或说话，以防RNase污染。建议戴一次性口罩操作。

对于操作环境中RNA酶的去除，推荐使用碧云天生产的RNase and DNase Away (R0123)以去除实验桌面上或其它接触面上的RNase。

本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。

废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。

结合液、洗涤液中含有乙醇，使用后须旋紧瓶盖以防挥发，并须按照易燃试剂的相关规范进行存放和使用。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。