化学信息：
|
化学名
|
9-cyclohexyl-N-(4-morpholin-4-ylphenyl)-2-naphthalen-1-yloxypurin-6-amine
|
|
|
简称
|
Purmorphamine
|
|
别名
|
UNII-PB12M2F8KY, Shh Signaling Antagonist VI, PB12M2F8KY
|
|
中文名
|
N/A
|
|
化学式
|
C31H32N6O2
|
|
分子量
|
520.62
|
|
CAS号
|
483367-10-8
|
|
纯度
|
98%
|
|
溶剂/溶解度
|
Water<1mg/ml; DMSO4mg/ml warming; Ethanol<1mg/ml
|
|
溶液配制
|
5mg加入0.96ml DMSO，或者每5.21mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SF6822-10mM用DMSO配制。
|
生物信息：
|
产品描述
|
Purmorphamine直接结合并激活Smoothened，阻断BODIPY-cyclopamine与Smo结合，在HEK293T细胞中IC50约为1.5μM，也诱导成骨细胞分化，EC50为1μM。
|
|
信号通路
|
Stem Cells & Wnt; GPCR & G Protein
|
|
靶点
|
Smoothened
|
－
|
－
|
－
|
－
|
|
IC50
|
~1.5μM
|
－
|
－
|
－
|
－
|
|
体外研究
|
Purmorphamine与Cyclopamine(一种Smo拮抗剂)竞争，直接结合和激活Smoothened，而激活Hedgehog通路，IC50为1.5μM。Purmorphamine作用于全能C3H10T1/2细胞，是有效的骨生成诱导剂。Purmorphamine作用于C3H10T1/2细胞的EC50(根据ALP表达)为1μM。Purmorphamine (1μM)和BMP-4(100ng/ml)联用，作用于3T3-L1细胞，使ALP活性增强90多倍。与BMP-4相比，Purmorphamine作用于多能间充质祖细胞，诱导骨生成，通过激活Hedgehog信号。
|
|
体内研究
|
Purmorphamine作用于基于大鼠结构的人间充质干细胞，上调ALP表达。
|
|
临床实验
|
N/A
|
|
特征
|
N/A
|
相关实验数据(此数据来自于公开文献，碧云天并不保证其有效性)：
|
酶活性检测实验
|
|
方法
|
使用BODIPY-Cyclopamine和过表达Smo的细胞进行Smo结合实验，使用CMV启动子，含SV40起点的表达载体，获得Smo-Myc3，缺失突变体Smo CRD (68到182位氨基酸缺失)和Smo CT (556到793位氨基酸缺失)。HEK 293T细胞在12孔板中的聚-D-赖氨酸处理的玻璃盖玻片上生长，直到70%汇合，然后使用FuGene 6，通过适当的表达载体(每孔0.5g)进行转染。转染两天后，HEK 293T细胞与含0.5%小牛血清，5nM BODIPY-Cyclopamine和不同浓度的Purmorphamine(0、1.5或5M)(每孔1ml)的DMEM培养基在37℃下温育1小时。然后使用1×PBS缓冲液(每孔1ml)洗涤过表达Smo的细胞，置于含DAPI的培养基，使用Leica DM4500B荧光显微镜观察。使用固定细胞进行结合检测，使用溶于1×PBS缓冲液(每孔1ml)的3%多聚甲醛在室温下固定过表达Smo的HEK293T细胞10分钟，然后使用含10mM甘氨酸和0.2%叠氮化钠的1×PBS缓冲液(每孔1ml)处理5分钟，使用1×PBS缓冲液(每孔1ml)洗涤，然后再使用含Purmorphamine的培养基在室温下处理4小时。
|
|
细胞实验
|
|
细胞系
|
C3H10T1/2细胞
|
|
浓度
|
0.5-10μM
|
|
处理时间
|
4天
|
|
方法
|
C3H10T1/2细胞在T175烧瓶中扩增，第13通道的细胞通过胰蛋白酶/EDTA分离，然后在生长培养基中稀释。使用Multi-dropTM液体传输系统，将产生的细胞悬浮液按每孔2500个细胞接种到黑色透明底384孔板中，孔中为100μl生长培养基。温育过夜后，细胞附着到孔的底部。使用Mini TrakTM多位分配系统，将溶于DMSO(500nl)的每组Purmorphamine储存液输送到对应孔中，确保Purmorphamine终浓度为5μM。然后细胞置于37℃下含5% CO2的空气中温育。4天后，除去培养基，10μl被动裂解缓冲液加入到每孔中。5分钟后，10μl碱性磷酸酶底物溶液添加到每孔中。在室温下温育15分钟后，在Acquest高通量酶标仪上对实验板进行读数。
|
|
动物实验
|
|
动物模型
|
N/A
|
|
配制
|
N/A
|
|
剂量
|
N/A
|
|
给药方式
|
N/A
|
参考文献：
1. Sinha S, et al. Nat Chem Biol, 2006, 2(1), 29-30.
2. Wu X, et al. J Am Chem Soc, 2002, 124(49), 14520-14521.
3. Wu X, et al. Chem Biol, 2004, 11(9), 1229-1238.
4. Faghihi F, Biomed Pharmacother, 2012, 3322(12).
包装清单：
|
产品编号
|
产品名称
|
包装
|
|
SF6822-10mM
|
Purmorphamine (Hedgehog/Smoothened激动剂)
|
10mM×0.2ml
|
|
SF6822-5mg
|
Purmorphamine (Hedgehog/Smoothened激动剂)
|
5mg
|
|
SF6822-25mg
|
Purmorphamine (Hedgehog/Smoothened激动剂)
|
25mg
|
|
—
|
说明书
|
1份
|
保存条件：
-20℃保存，至少一年有效。5mg和25mg包装也可室温保存，至少6个月有效。如果溶于非DMSO溶剂，建议分装后-80℃保存，预计6个月内有效。
注意事项：
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
微信在线咨询
微信在线咨询
