问：我用RIPA裂解液裂解完之后忘记离心了，直接加入了SDS loading去煮样了，会有什么影响呢？小云 2025-06-29 00:13:07

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碧云爱答说： 2025-06-30 10:42:20

蛋白量不能标定，可以loading buffer煮样后再离心后上样。

问：您好，请问裂解完之后12000转离心之后并没有细胞沉淀，只有一些粘稠絮状物在下面，上面有一点点上清，这是正常的吗？小云 2025-06-16 11:23:33

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碧云爱答说： 2025-06-16 11:32:46

粘稠的是基因组DNA，可以检测蛋白浓度看看。

问：600万个贴壁细胞收集至一个离心管加入对应体积的裂解液会因为细胞数较多影响裂解效果吗小云 2023-09-19 16:34:26

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碧云爱答说： 2023-09-20 09:59:21

裂解的过程可以过几分钟，进行颠倒混匀或者震荡处理。

问：用该裂解液提取蛋白未在冰上操作会导致提取的蛋白样品降解吗小云 2023-09-19 18:00:08

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碧云爱答说： 2023-09-20 09:55:49

跟放置的时间也有关系，跟蛋白的类型也有关系，请根据后续的WB检测进行判断。

问：贴壁细胞裂解时也需要分装成50—100万细胞每管吗，动物细胞需要在冰上裂解多久再进行离心呢？如果加入200微升裂解液取上清时推荐取多少微升？小云 2023-09-19 15:55:22

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碧云爱答说： 2023-09-19 16:10:47

不需要的，按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。

问：200μRIPA加多少PMSF 小云 2023-08-18 16:35:39

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碧云爱答说： 2023-08-20 19:17:26

PMSF的终浓度是1mM,如果 PMSF的母液浓度是100mM,则需要加入2微升。

问：10cm皿加多少RIPA 小云 2023-08-11 09:26:54

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碧云爱答说： 2023-08-11 14:33:37

6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。裂解液用量按孔板底面积进行相应换算，平皿较大，更推荐把细胞分成每管大约100万细胞以保证充分裂解

问：室温放置一晚会有影响吗？小云 2023-08-06 18:09:44

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碧云爱答说： 2023-08-09 15:32:54

可以正常使用

问：因为要做一些实验需要精确的PH，想问一下RIPA lysis buffer的PH7.4指的是在4度下的PH吗小云 2023-07-11 16:04:49

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碧云爱答说： 2023-07-12 14:31:34

应该是25℃

问：用RIPA强裂解液提蛋白，会有粘稠透明的团块，如果用弱裂解液是不是就不会有这种情况产生？小云 2022-08-29 17:34:16

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小云说： 2023-06-30 15:21:58

你好，我的RAW细胞用强Ripa就会有团块，用弱的就没有了，你可以试试

碧云爱答说： 2022-08-30 09:15:31

不一定的，RIPA弱也可能出现这个现象