问:你好,我们尝试了多次核质分离的protocol,始终无法完全将细胞核和细胞浆分离开,在细胞核中一直都能看到tubulin蛋白,细胞浆中也同样,有什么改进的方法呢 小云 2025-06-26 16:07:56

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碧云爱答说: 2025-06-27 10:20:17

需要新鲜的细胞或者组织样品,分离得到的细胞核沉淀可以用PBS洗涤,去除胞浆蛋白的污染,细胞核中有细胞浆蛋白,要注意前面裂解震荡的程度。

问:请问20ul细胞沉淀加200ul细胞浆蛋白试剂A,10ul浆蛋白B,50ul核蛋白试剂,这个比例是固定的吗?细胞数量不到200万,我如果降低(比如加150ul A液),其他的也需要都按比例降低吗 小云 2025-06-20 14:51:37

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碧云爱答说: 2025-06-23 08:44:20

这个比例是固定的,但是不建议减少细胞的用量。

问:请问这个是细胞核蛋白可以用来提取-80冷冻的组织蛋白吗? 小云 2025-06-18 17:10:52

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碧云爱答说: 2025-06-19 08:55:36

不建议的,仅适合新鲜样品的检测。

问:您好,请问按试剂盒操作完了,所得到的蛋白可以直接用来跑蛋白嘛? 小云 2023-09-21 23:17:33

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碧云爱答说: 2023-09-22 10:54:36

与loading buffer混合煮沸后可以用于电泳检测。

问:试剂盒在室温下存放了两三天有影响吗 小云 2023-09-19 14:32:42

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碧云爱答说: 2023-09-19 14:35:03

需要做预实验看一下试剂盒的分离效果。

问:你好,想问一下这个试剂盒可以用来分开分析细胞核和细胞质的RNA吗。 小云 2023-09-08 10:33:01

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碧云爱答说: 2023-09-08 11:25:36

目前仅测试过用于蛋白的分离,RNA没有相关的数据。

问:您好,请问可以用这个试剂盒分离染色质吗? 小云 2023-09-06 15:45:55

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碧云爱答说: 2023-09-07 10:24:36

不能用来分离染色质。

问:你好,我用293FT细胞分离(P100长满),分离出来的浆蛋白定量只有0.5ug/ul,核蛋白只有1ug/ul,与说明书上的提取量不符,请问是什么原因?已经重复了六七次了 小云 2023-08-31 10:54:09

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小云说: 2023-09-02 15:41:14

有做WB检测,但是重复很多次浓度都很低,步骤应该基本一致

碧云爱答说: 2023-09-01 10:39:14

是否有做WB 检测,具体的操作步骤请提供下,分离细胞核蛋白时,半小时的震荡重悬的步骤很关键,一定要确保细胞被完全重悬起来。

问:您好,请问分离出的细胞核蛋白可以进一步分离得到染色质蛋白吗? 小云 2023-08-29 10:44:56

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碧云爱答说: 2023-08-29 11:11:56

目前没有办法进一步分离某一种核蛋白。

问:请问一下,我提出来细胞核蛋白和细胞质蛋白之后,用BCA蛋白浓度测定提出来的蛋白浓度时,我的稀释的缓冲液应该用哪一种呢? 小云 2023-08-28 17:39:58

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碧云爱答说: 2023-08-29 11:03:34

可以用蛋白所在的溶液。

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