产品简介:
来源 |
用途 |
交叉反应性 |
CENP-A分子量 |
Rabbit |
WB, IP, IF |
H, (Mk) |
~17kD |
WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF, Immunofluorescence.
H, human; Mk, monkey.
本Phospho-CENP-A(Ser7)抗体(Phospho-CENP-A(Ser7)antibody)为进口分装,用人工合成的含磷酸化Ser7的一段人CENP-A多肽进行适当修饰后免疫rabbit,然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。
本Phospho-CENP-A(Ser7)抗体识别Ser7被磷酸化的CENP-A,可以检测内源性的Phospho-CENP-A(Ser7)蛋白水平,不识别其它组蛋白,包括histone H3。
染色质结构调控在真核细胞转录和复制的调节中起着重要作用。核小体是染色质的主要构架,由四种核心组蛋白(histones)组成,包括H2A、H2B、H3和H4。除了众多的翻译后组蛋白修饰包括磷酸化、乙酰化和甲基化等机制,细胞中组蛋白和类组蛋白(variant histone or histone like protein)的互换,也可以直接或间接地影响染色质结构。着丝粒蛋白CENP(centromere proteins)包括CENP-A、CENP-B和CENP-C,是着丝点(kinetochore)的组成蛋白。CENP-A,也称CSE4(capping-enzyme suppressor 4-p),是重要的类组蛋白,和histone H3的氨基端有62%的同源性,它可以取代着丝粒异染色质上的histone H3,和DNA直接结合。CENP-A和histone H3的氨基端47个氨基酸残基没有相似性,CENP-A的氨基末端可以结合核小体之间的linker DNA,协助着丝粒异染色质的正确组装和折叠。CENP-A的多种功能受磷酸化调节。CENP-A的Ser7在有丝分裂早期的初始阶段(early prophase),在histone H3被磷酸化后,可以被Aurora-A和Aurora-B蛋白激酶所磷酸化。CENP-A的磷酸化对于着丝点(kinetochore)正确结合到微管和有丝分裂中染色体的正确排列都是必需的。CENP-A在有丝分裂后期的初始阶段(early anaphase),在histone H3去磷酸化之前,会被去磷酸化。CENP-A和histone H3磷酸化的时间差异,提示两者尽管有非常相似的磷酸化位点,但它们的生物学功能是有所不同的。CENP-A敲除小鼠会出现严重的有丝分裂缺陷,导致胚胎致死,通常不超过胚胎发育的第6.5天。
配套提供了Western一抗稀释液,可以用于Western检测时的一抗稀释。
建议抗体使用时的稀释比例如下(实际使用时需根据抗原水平的高低作适当调整):
WB |
IP |
IF |
1:1000 |
1:25 |
1:100 |
本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
包装清单:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
AC305-1
|
Phospho-CENP-A(Ser7)抗体 |
20μl |
AC305-2 |
Western一抗稀释液 |
20ml |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:
Phospho-CENP-A(Ser7)抗体-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。
注意事项:
对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。