使用说明：
1.从培养的动物细胞中抽提并检测DNA ladder
  a．收集约100万个细胞，离心沉淀，弃上清。加入200微升PBS，轻轻吹散或弹散细胞，使细
     胞重悬于PBS中。
      需自备PBS。如果使用冻存的细胞沉淀，先把细胞沉淀解冻，并轻轻弹散，然后再加入PBS重悬细
      胞。
  b．加入4微升RNase A，Vortex混匀。室温(15-25℃)放置3-5分钟。
  c．加入20微升蛋白酶K，Vortex混匀。
  d．加入200微升样品裂解液B，Vortex混匀。70℃孵育10分钟。
      加入样品裂解液B后必须立即Vortex混匀。不可把蛋白酶K直接和样品裂解液B混合。
  e．加入200微升无水乙醇，Vortex混匀。
      加入乙醇后必须充分混匀，否则会严重影响抽提效果。加入乙醇后可能产生白色沉淀，属正常现
      象，后续步骤中必须把白色沉淀和溶液全部转移到纯化柱内。
  f．把步骤e中的混合物加入到DNA纯化柱内。≥6000g(约≥8000rpm)离心1分钟。倒弃废液
     收集管内液体。
      进行本步骤前需将纯化柱置于废液收集管上。倒弃废液后回收废液收集管。
      注意：必须把沉淀全部转移到DNA纯化柱内，否则会严重影响抽提效果！
  g．加入500微升洗涤液I，≥6000g(约≥8000rpm)离心1分钟。倒弃废液收集管内液体。
      进行本步骤前需将纯化柱置于废液收集管上。倒弃废液后回收废液收集管。
  h．加入600微升洗涤液II，≥18000g(约≥12000rpm)离心1分钟。倒弃废液收集管内液体。
      进行本步骤前需把纯化柱置于废液收集管上。倒弃废液后回收废液收集管。
  i．再≥18000g(约≥12000rpm)离心1分钟，以去除残留的乙醇。
      不可把步骤h的离心时间延长而省略本步骤。倒弃废液后再离心可以确保充分去除残留的乙醇。
  j．将DNA纯化柱置于一洁净的1.5ml离心管上，加入50-100微升洗脱液。室温放置1-3分钟。
     ≥12000rpm离心1分钟。所得液体即为纯化得到的总DNA。
      洗脱液需要直接加至纯化柱管内柱面中央，使液体被纯化柱吸收。如果有必要，可以使用去离子
      水或TE进行洗脱。使用较小体积的洗脱液可以使获得的总DNA的浓度较高，但洗脱下来的DNA量相
      对较少。
  k．取部分抽提得到的DNA，1%琼脂糖凝胶电泳分析。如果细胞发生凋亡，即可观察到典型的DNA
      ladder。电泳时一定要注意换用新鲜配制的电泳液，DNA凝胶也要用新鲜配制的电泳液配制并新鲜
      配制后使用。电泳时为获取最佳的电泳效果使ladder充分分开，电泳速度宜适当慢一些，凝胶宜
      适当长一些，而加样孔宜更加扁平一些。选取适当较薄的梳齿，往往会获得更好的ladder电泳效
      果。
2.从动物组织中抽提并检测DNA ladder
  a．取不超过25mg的组织(脾不超过10mg)，剪切成尽可能小的碎片，加入180微升样品裂解液
     A。
      请勿使用过多的样品，过多的样品会导致抽提效果下降。较小的组织碎片会使裂解速度加快，裂
      解效果提高。新鲜或冻存的组织均可，但固定过的组织请参考后续的其它步骤进行。
  b．加入20微升蛋白酶K，Vortex混匀，55℃水浴孵育至完全裂解。
      在孵育期间可以偶尔取出样品Vortex以加快裂解速度。裂解的时间因组织不同而有所不同，通常
      可在1-3小时内完成。为方便起见，可以直接裂解过夜，裂解过夜对抽提效果无任何负面影响。组
      织完全裂解后可以呈粘稠状，但不应该呈可把DNA纯化柱堵住的凝胶状。如果消化过夜仍呈凝胶
      状，说明样品用量过多，作为补救措施，可以把整个反应体系放大一倍。
  c．加入4微升RNase A，Vortex混匀。室温(15-25℃)放置3-5分钟。
  d．最高速剧烈Vortex 15秒。加入200微升样品裂解液B，Vortex混匀。70℃孵育10分钟。
      加入样品裂解液B后需立即Vortex混匀。加入样品裂解液B后可能会产生白色沉淀，但大多数情况
      在70℃孵育后会溶解。即使70℃孵育后仍有白色沉淀也不会干扰后续实验。有些组织例如肺、
      脾，在加入样品裂解液B后可能会形成凝胶状物，此时需剧烈晃动或Vortex样品，以尽量破坏凝胶
      状物。
  e．转步骤1.e，后续步骤同“从培养的动物细胞中抽提总DNA”1.e起的步骤。

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1. Wang N, Hou L, Zhu ZY, Zhang JY, Ju CX, Ge YL, Yue W.
   Effect of 2, 3-dioxo indoline on apoptosis and human telomera se reverse transcr ipta se
   mRNA in SH2SY5Y cells.
   Chinese Pharm acological B ulletin. 2007 May;23(5):680～4.
2. Qian YF, Yao WB, Wang H, Gao XD.
   The Mechanism of Kaixin San Inhibiting Apoptosis in Hydrogen Peroxide2induced PC12
   Cells.
   Chin J Nat Med. Sep.2007 Vol.5 No.5.
3. Qian YF, Wang H, Yao WB, Gao XD.
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   of caspase cascade.
   Cell Biol Int. 2008 Feb;32(2):304-11.
4. Bai Y, Li Q, Yang J, Zhou X, Yin X, Zhao D.
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   neuroblastoma cells.
   Neurosci Res. 2008 Sep;62(1):9-14. Epub 2008 May 23.
5. Cai L, Wang H, Li Q, Qian Y, Yao W.
   Salidroside inhibits H2O2-induced apoptosis in PC12 cells by preventing cytochrome c
   release and inactivating of caspase cascade.
   Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai). 2008;40(9):796-802.
6. Wang H, Xu Y, Yan J, Zhao X, Sun X, Zhang Y, Guo J, Zhu C.
   Acteoside protects human neuroblastoma SH-SY5Y cells against beta-amyloid-induced cell
   injury.
   Brain Res. 2009 Aug 4;1283:139-47. Epub 2009 Jun 9.
7. Chai J, Xiong Q, Zhang P, Zheng R, Peng J, Jiang S.
   Induction of Ca2+ signal mediated apoptosis and alteration of IP3R1 and SERCA1
   expression levels by stress hormone in differentiating C2C12 myoblasts.
   Gen Comp Endocrinol. 2010;166(2):241-9. Epub 2009 Aug 31.
8. Li J, Xu Z, Tan M, Su W, Gong XG.
   3-(4-(Benzo[d]thiazol-2-yl)-1-phenyl-1H-pyrazol-3-yl) phenyl acetate induced Hep G2 cell
   apoptosis through a ROS-mediated pathway.
   Chem Biol Interact. 2010 Feb 12;183(3):341-8. Epub 2009 Dec 16.
9. Wang L, Xu T, Lei WW, Liu DM, Li YJ, Xuan RJ, Ma JJ
   Cadmium-induced oxidative stress and apoptotic changes in the testis of freshwater
   crab,Sinopotamon henanense.
   PLoS One. 2011;6(11):e27853.
10.Wang J, Wang Q, Li J, Shen Q, Wang F, Wang L
   Cadmium induces hydrogen peroxide production and initiates hydrogen
   peroxide-dependentapoptosis in the gill of freshwater crab, Sinopotamon henanense.
   Comp Biochem Physiol C Toxicol Pharmacol. 2012 Jun 9.
11.Zhu H, Xia L, Zhang Y, Wang H, Xu W, Hu H, Wang J, Xin J, Gang Y, Sha S, Xu B, Fan D,
   Nie Y, Wu K
   Activating transcription factor 4 confers a multidrug resistance phenotype to gastric
   cancer cellsthrough transactivation of SIRT1 expression
   PLoS One. 2012;7(2):e31431.
12.Lu B, Xu Y, Xu L, Cong X, Yin L, Li H, Peng J.
   Mechanism investigation of dioscin against CCl(4)-induced acute liver damage in mice.
   Environ Toxicol Pharmacol. 2012 Mar 30;34(2):127-135.
13.Gao Q, Qi L, Wu T, Wang J.
   An important role of interleukin-10 in counteracting excessive immune response in HT-29
   cellsexposed to Clostridium butyricum.
   BMC Microbiol. 2012 Jun 8;12(1):100.
14.Ji MM, Liu AQ, Gan LP, Xing R, Wang H, Sima YH, Xu SQ.
   Functional analysis of 30K proteins during silk gland degeneration by a
   caspase-dependent pathway in Bombyx.
   Insect Mol Biol. 2013 Jun;22(3):273-83. doi: 10.1111/imb.12019. Epub 2013 Mar 18.
15.Wang B, Yu T, Dong X, Zhang Z, Song L, Xu Y, Zhang XH.
   Edwardsiella tarda invasion of fish cell lines and the activation of divergent cell
   death pathways.
   Vet Microbiol. 2013 May 3;163(3-4):282-9. doi: 10.1016/j.vetmic.2012.12.027.
   Epub 2013 Jan 17.
16.Zhang WJ, Zhang WG, Zhang PY, Cao XM, He AL, Chen YX, Gu LF.
   The expression and functional characterization associated with cell apoptosis and
   proteomic analysis of thenovel gene MLAA-34 in U937 cells.
   Oncol Rep. 2013 Feb;29(2):491-506. doi: 10.3892/or.2012.2129. Epub 2012 Nov 7.
17.Liao Y, Shen W, Kong G, Lv H, Tao W, Bo P.
   Apigenin induces the apoptosis and regulates MAPK signaling pathways in mouse macrophage
   ANA-1 cells.
   PLoS One. 2014 Mar 19;9(3):e92007. doi: 10.1371/journal.pone.0092007. eCollection
   2014.
18.Wang T, Zhou J, Gan X, Wang H, Ding X, Chen L, Wang Y, DU J, Shen J, Yu L.
   Toxoplasma gondii induce apoptosis of neural stem cells via endoplasmic reticulum stress
   pathway.
   Parasitology. 2014 Jun;141(7):988-95. doi: 10.1017/S0031182014000183. Epub 2014 Mar
   10.
19.Li LJ, Xu NW, Gao RL, Lin XJ, Qiu HY, Liu WH, Jin YJ, Zhao ML.
   Effects of Danshen Injection () on inhibiting proliferation and inducing apoptosis
   through down-regulation of mutant JAK2 gene and its protein phosphorylation in human
   erythroid leukemic cells.
   Chin J Integr Med. 2014 May;20(5):381-6. doi: 10.1007/s11655-014-1806-6. Epub 2014
   Mar 7.