糖基化修饰是一种蛋白质翻译后修饰几乎存在于所有生物体中,包括真核生物、真细菌和古细菌。糖基化修饰的多样性会改变蛋白的质量和电荷,在蛋白质分类、免疫识别、受体结合、炎症、致病性和许多其他过程中发挥着关键的生物功能,因此糖基化在蛋白质的生物过程中发挥重要作用。而去糖基化是研究糖蛋白生物学功能的重要手段,碧云天最新推出PNGase F去糖基化试剂盒,助力糖生物学研究。
产品信息
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
P2318S | PNGase F去糖基化试剂盒 | 25次 |
P2318M | PNGase F去糖基化试剂盒 | 100次 |
P2318L | PNGase F去糖基化试剂盒 | 500次 |
碧云天生产的PNGase F去糖基化试剂盒可在天然或变性条件下从糖蛋白或糖多肽中切割N-糖苷键,从而去除N-聚糖链,切割位点如图1所示。该产品可用于抗体、免疫球蛋白融合蛋白或其它糖蛋白的体外去除N-糖基化修饰反应,如利用Concanavalin A磁珠分离细胞或膜蛋白后,可使用PNGase F酶进行糖基的切除,从而使糖蛋白从Concanavalin A磁珠上解离下来,对于后续膜蛋白的质谱分析有很大帮助。
碧云天PNGase F去糖基化试剂盒移除N-糖苷的示意图
产品用途:
1.抗体、免疫球蛋白融合蛋白或其它糖蛋白的体外去N-糖基化修饰
2.检测表征蛋白是否存在N-糖基化修饰。
产品优势:
该试剂盒提供的PNGase F的N端带有His-tag ,可以通过相应的His抗体琼脂糖凝胶、磁珠或镍柱吸附去除。
产品特点:
● 适用范围广:可在天然或变性条件下从糖蛋白或 糖多肽中切割N-糖苷键;
● 可以切割几乎所有类型的N-多糖:糖基肽酶F可以在几乎所有类型的N- 多糖如高甘露糖、混合型和复杂寡聚糖的最内端N- 乙酰葡萄糖胺和天冬酰胺残基的连接处切割,从而去除N-聚糖链。可用于抗体、免疫球蛋白融合蛋白或其它糖蛋白的体外去除N-糖基化修饰反应;
● 使用便捷:该试剂盒提供的PNGase F的N端带有His-tag ,可以通过相应的His抗体琼脂糖凝胶、磁珠或镍柱吸附去除。
产品效果:
体外酶解去糖基化修饰反应根据对糖蛋白或糖肽的处理方式不同, 可分为变性去糖基化修饰反应和非变性去糖基化修饰反应。
变性去糖基化修饰反应:蛋白质变性导致三级结构被破坏, 内部序列暴露可以去除所有糖基化修饰;
非变性去糖基化修饰反应:蛋白原始构象被保留,三级结构中暴露在外的糖苷被移除,但是处于内部的糖苷被保留, 蛋白的酶活性或抗原性很可能不受影响。本试剂盒去除变性和非变性蛋白的N-糖基化修饰的效果如图2所示,用户可根据实验目的选择相应的去糖基化修饰反应。
图1. 碧云天PNGase F去糖基化试剂盒(P2318)去除蛋白N-糖基化修饰效果图。 在20μl反应体系中,加 入10µg变性或非变性的N-糖基化修饰蛋白(含有4个N-linked糖基化修饰)及相应量的PNGase F ,37℃孵育1 小时后,加入4μl SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(6X) (P0289),混匀后95℃加热5分钟,经BeyoGel™ Plus PAGE预制胶(Tris-Gly,4-20%, 10孔) (P0468)电泳,Marker为BeyoColor™彩色预染蛋白分子量标准(6.5-270kD) (P0071/P0072),并经BeyoBlue™考马斯亮蓝超快染色液(P0017F)染色。实际效果会因样品种类、检测条件等的不同而存在差异,图中效果仅供参考。
除了PNGase ,碧云天还有诸多新品上线,为大家的科研助力 ,订购信息如下: