细胞凋亡是当前生命科学研究中热门的的领域，Caspase-3活性和线粒体膜电位改变是判断细胞凋亡是否发生的关键指标，通过实时监测Caspase-3的活性与线粒体膜电位可判断细胞凋亡发生。碧云天全新推出活细胞Caspase-3活性与线粒体膜电位检测试剂盒，该试剂盒不仅可以在活细胞中检测Caspase-3活性，还能监测线粒体膜电位。
产品效果
图1. 活细胞Caspase-3活性与线粒体膜电位检测试剂盒(C1073)检测Caspase-3活性以及线粒体膜电位的效果图。正常培养的 BGC-823细胞(人胃癌细胞)在明场下的形态见图A，正常细胞内线粒体被Mito-Tracker Deep Red 633染成洋红色荧光(伪彩色) (图C)。经TS处理3h的BGC-823细胞在明场下的形态见图E。凋亡细胞的细胞核呈绿色荧光(图F)，线粒体呈洋红色荧光(伪彩色) (图G)。TS是由TNFα、SM-164组成的细胞凋亡诱导试剂(C0006S)。
活细胞Caspase-3活性与线粒体膜电位检测试剂盒
碧云天生产的活细胞Caspase-3活性与线粒体膜电位检测试剂盒是基于线粒体膜电位依赖性的远红外荧光探针Mito-Tracker Deep Red 633联合Caspase-3酶的荧光底物GreenNuc™ Caspase-3 Substrate检测线粒体膜电位以及凋亡细胞内Caspase-3酶活性的试剂盒。本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪等荧光检测设备。
产品信息
| 产品编号 | 产品名称 | 包装 |
| C1073S | 活细胞Caspase-3活性与线粒体膜电位检测试剂盒 | 20次 |
| C1073M | 活细胞Caspase-3活性与线粒体膜电位检测试剂盒 | 50次 |
产品优势
本试剂盒中的检测试剂配制完成后可直接加入细胞，对细胞活性没有明显的抑制作用，不影响Caspase的表达，不抑制细胞的凋亡过程，检测过程仅需20-30分钟，实现实时监测细胞凋亡。
产品原理
本试剂盒通过检测GreenNuc™-DNA复合物的绿色荧光(Ex/Em=500/530nm)和依赖于线粒体膜电位的Mito-Tracker Deep Red 633的远红外荧光(Ex/Em=622/648nm)，显示细胞的Caspase-3酶活性以及线粒体膜电位，从而判定细胞凋亡的发生。GreenNuc™-DNA复合物和Mito-Tracker Deep Red 633的激发光谱和发射光谱如下图：
图2. GreenNuc™-DNA复合物和Mito-Tracker Deep Red 633的激发光谱与发射光谱。
产品特点
● 实时监测凋亡情况: 本试剂盒中提供的荧光底物GreenNuc™ Caspase-3 Substrate对细胞活性没有明显的抑制作用，不影响Caspase的表达，不抑制细胞的凋亡过程，能实时监测细胞凋亡；
● 兼容设备广泛：本试剂盒适用于荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪等荧光检测设备；
● 功能强大：使用本试剂盒检测Caspase-3活性的同时，还能够实时监测细胞内线粒膜电位的变化；
● 使用便捷，检测快速：本试剂盒中检测试剂配制后直接加入细胞中，孵育20-30分钟后即可直接用于荧光显微镜、流式细胞仪或荧光酶标仪检测等检测系统进行定性或定量检测。
本试剂盒针对于6、12、24、96孔板，推荐每孔所需的检测工作液的用量分别为0.5~1ml、200~500μl、100~200μl和50~100μl。以12孔板每孔200μl染色工作液的体系为例，参考下表配制检测工作液：
| 样品数 | 1 | 5 | 10 | 20 |
| GreenNuc™ Caspase-3 Substrate (1mM) | 1μl | 5μl | 10μl | 20μl |
| Mito-Tracker Deep Red 633 | 1μl | 5μl | 10μl | 20μl |
| 检测缓冲液 | 198μl | 990μl | 1.98ml | 3.96ml |
| 检测工作液体积 | 200μl | 1ml | 2ml | 4ml |
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