His标签(His-tag)、Flag标签(Flag-tag)、Myc标签(Myc-tag)、HA标签(HA-tag)和GST标签(GST-tag)等是最常见的一些标签,其中His-tag分子量非常小,只有0.84kDa,通常不会与目的蛋白相互作用,并且大多数情况下不会影响目的蛋白的功能,通常不会形成二聚体,并对蛋白的下游应用没有影响;His标签已被广泛应用于蛋白表达、纯化、鉴定、相互作用和功能等多方面的研究。一般使用His标签蛋白纯化介质(镍柱)对His标签蛋白进行纯化,但对于带有His标签蛋白或蛋白复合物的少量纯化或免疫沉淀等应用,His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠更简单、便捷。
IDA、NTA和TED分别拥有3、4、5个配位位点与镍离子结合,这样镍离子空余的能与组氨酸标签结合的位点为3、2、1个,所以IDA与His标签蛋白结合力相对最强,载量最高,但特异性较弱,可用低浓度的咪唑进行高效洗脱,而TED则相反。NTA与His标签蛋白的作用介于两者之间。
碧云天最新研发生产的BeyoMag™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(IDA-Ni),即IDA-Ni His标签蛋白纯化磁珠由高质量的亚氨基二乙酸(IDA)共价偶联至琼脂糖磁珠,再通过IDA的3个结合位点螯合二价镍离子(Ni2+)制备而成,可特异性地与动植物或者微生物裂解液、血清、腹水等样品中含有His标签的蛋白结合,从而用于带有His标签蛋白或蛋白复合物的纯化、免疫沉淀(IP)或免疫共沉淀(Co-IP)。
产品效果:
图1. 碧云天BeyoMag™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(IDA-Ni) (P2239)用于His标签融合蛋白的纯化效果图。
产品原理:
BeyoMag™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(IDA-Ni)可特异性地结合His标签融合蛋白,并可以借助磁力架等磁分离设备非常便捷地应用于带有His标签的融合蛋白或其蛋白复合物的纯化或免疫沉淀等实验。本产品的工作原理与操作流程请参考图1。
图2. 碧云天BeyoMag™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(IDA-Ni) (P2239)工作原理与操作流程图。
产品特点:
● 稳定性高、特异性强、靶蛋白结合量高:与国内外大多数的同类产品相比,本产品镍离子配基密度高,脱落程度低,对带有His标签蛋白的结合具有很强的特异性。本产品每毫升悬浊液含约25%琼脂糖磁珠沉淀,含有不少于30-50μmol/ml的IDA-Ni2+,通常每毫升磁珠(100%磁珠)可结合20-40mg His标签融合蛋白,具体的最大结合量和标签蛋白的分子量大小等相关。
● 可结合多种形式的His标签蛋白:可特异性地结合N端His融合蛋白(His-Protein)、C端His融合蛋白(Protein-His)。
● 结合目的蛋白速度快:使用了IDA螯合的镍离子,粒径在100μm左右。通常30分钟内即可完成His蛋白吸附的过程,60分钟内完成目的蛋白纯化或免疫沉淀操作。缩短操作时间可以有效避免在长时间操作过程中目的蛋白的降解或变性,充分保证目的蛋白的活性。
● 可高效洗脱His标签蛋白:可根据目的蛋白的结构、生物学功能及后续应用的要求等,使用咪唑进行多次洗脱。洗脱时间短,洗脱效率高。
● 耐变性剂:可以耐受6M盐酸胍或8M尿素。
● 使用便捷:本产品储存在特殊保护液中,不含甘油,可以通过磁性吸附实现快速高效的分离,无需离心操作。
产品信息:
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
产品价格 |
P2210 |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) |
10ml |
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P2218 |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) |
100ml |
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P2220 |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐还原螯合型) |
1000ml |
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P2221-10ml |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (Fast Flow, 耐还原螯合型) |
10ml |
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P2221-100ml |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (Fast Flow, 耐还原螯合型) |
100ml |
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P2221-1000ml |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (Fast Flow, 耐还原螯合型) |
1000ml |
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P2226 |
His标签蛋白纯化试剂盒(耐还原螯合型) |
10ml |
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P2229S |
His标签蛋白纯化试剂盒(耐变性剂型) |
10ml |
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P2233-10ml |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) |
10ml |
|
P2233-100ml |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) |
100ml |
|
P2233-1000ml |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (耐变性剂型) |
1000ml |
|
P2236-10ml |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (Fast Flow, 耐变性剂型) |
10ml |
|
P2236-100ml |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (Fast Flow, 耐变性剂型) |
100ml |
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P2236-1000ml |
BeyoGold™ His-tag Purification Resin (Fast Flow, 耐变性剂型) |
1000ml |
|
P2135-0.5ml |
BeyoMag™ Anti-His Magnetic Beads (Anti-His磁珠) |
0.5ml |
|
P2135-2ml |
BeyoMag™ Anti-His Magnetic Beads (Anti-His磁珠) |
2ml |
|
P2239-2ml |
BeyoMag™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(IDA-Ni) |
2ml |
|
P2239-10ml |
BeyoMag™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(IDA-Ni) |
10ml |
|
P2239-50ml |
BeyoMag™ His标签蛋白纯化琼脂糖磁珠(IDA-Ni) |
50ml |
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FMS012 |
BeyoMag™磁分离架(12孔) |
1个/袋 |
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FMS024 |
BeyoMag™磁分离架(24孔) |
1个/袋 |
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FMS096 |
BeyoMag™磁分离架(96孔) |
1个/盒 |
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FMS004 |
BeyoMag™磁分离架(4孔, 1.5ml/2ml, 蓝) |
1个/盒 |
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FMS008 |
BeyoMag™磁分离架(8孔, 1.5ml/2ml, 蓝) |
1个/盒 |
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FMS016 |
BeyoMag™磁分离架(16孔, 1.5ml/2ml, 蓝) |
1个/盒 |
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FMS154 |
BeyoMag™磁分离架(4孔, 15ml, 蓝) |
1个/盒 |
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FMS504 |
BeyoMag™磁分离架(4孔, 50ml, 蓝) |
1个/盒 |
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FMS081 |
BeyoMag™磁分离架(96孔, PCR板, 蓝) |
1个/盒 |
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FMS085 |
BeyoMag™磁分离架(96孔, 平底板, 蓝) |
1个/盒 |
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FMS009 |
BeyoMag™磁分离架(8孔, 1.5ml/2ml, 铝合金) |
1个/盒 |
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FMS017 |
BeyoMag™磁分离架(16孔, 1.5ml/2ml, 铝合金) |
1个/盒 |
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FMS025 |
BeyoMag™磁分离架(24孔, 1.5ml/2ml, 铝合金) |
1个/盒 |
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FMS082 |
BeyoMag™磁分离架(96孔, PCR板, 铝合金) |
1个/盒 |
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FMS086 |
BeyoMag™磁分离架(96孔, 细胞培养板, 铝合金) |
1个/盒 |
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