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仅需15-20分钟!轻松提取高质量血液RNA!

RNA按照长度可以分为长链RNA (Long RNA)和小RNA (Small RNA),长链RNA通常大于200nt,而小RNA通常小于200nt。长链RNA按照是否编码蛋白或多肽可以分为长链非编码RNA (Long noncoding RNA, lncRNA)和mRNA。近期,碧云天上架了一种基于离心柱法从血液中安全、快速、便捷、稳定、高效、高质量地抽提长度大于200nt的RNA的试剂盒——RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式),抽提获得的大于200个核苷酸的RNA (也常被称为总RNA)可以用于各种常规用途。

产品应用
本试剂盒主要用于抽提血液中长度大于200nt的RNA。抽提得到的RNA可用于反转录、RT-PCR、qPCR、Northern、点杂交(Dot Blot)、纯化mRNA、体外翻译、RNase protection assay、cDNA克隆等下游实验;也可用于基因表达芯片分析(Microarray)、高通量测序(High throughput sequencing)等对RNA质量要求较高的情况。

产品原理
如图1所示,样品在裂解液中迅速裂解,释放出总RNA,然后让RNA特异性地结合到纯化柱上,而基因组DNA和蛋白质等其它组分通过高速离心被有效去除,再通过3次洗涤充分去除非特异性结合的蛋白、盐等杂质,最后用洗脱液将高纯度的RNA洗脱下来。

图1.碧云天RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) (R0091) RNA抽提流程示意图。

产品效果

图2.碧云天RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) (R0091)对小鼠血液样品的抽提效果。小鼠全血新鲜样品(ctrl)和用RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)分别在4℃保存30天、室温保存7天以及37℃保存1天后,使用本产品抽提RNA,随后取相同体积的RNA样品进行电泳。电泳条件为:RNA样品变性处理后,在含6.67%甲醛和适量NA-Red (D0128)的1%变性琼脂糖凝胶中进行电泳检测。实测效果可能有所不同,本图仅供参考。

产品特点
使用安全:本试剂盒通过特殊的柱纯化介质进行RNA分离纯化,能有效避免传统的TRIzol LS法抽提时使用的酚、氯仿等有毒有害有机试剂;
快速、便捷:本试剂盒无需使用红细胞裂解液去除无核的红细胞,避免RNA降解;采用柱纯化,无需繁琐的RNA沉淀步骤,抽提操作过程仅15-20分钟。相比于传统的TRIzol LS抽提法,本试剂盒的操作流程显著简化,缩短了抽提时间,降低了RNA被降解的风险。和国外同类柱纯化产品相比,所需操作步骤和操作时间基本一致;
得率高、纯度高:纯的RNA其A260/A280约为2.0,但在很多仪器上测定时会高于2.0,低于1.9通常认为有蛋白、DNA或者酚等的污染;纯的RNA其A260/A230约为2.0左右或者略高,低于1.9通常认为有碳水化合物、胍盐、多肽或酚等的污染。本试剂盒效果经反复测试,抽提得到的RNA的A260/A280通常为2.0-2.2,A260/A230通常为1.9-2.1。

选择指南
本产品适用于纯化200nt以上的RNA,对小于200nt的small RNA即小RNA (如5.8S rRNA、5S rRNA、tRNA、miRNA、piRNA等)被选择性地去除,如果希望抽提得到小于200nt的小RNA,推荐使用碧云天的BeyoMag™磁珠法血液RNA提取试剂盒(R0093)

本试剂盒适用于新鲜、冻存、经EDTA、肝素等抗凝处理或经过RNALater™血液RNA稳定保存液(R0116)保存的血液RNA的抽提,推荐的血液样品量为200μl。本试剂盒小、中和大包装可分别用于12、50和200个样品的RNA抽提。

产品信息

产品编号 产品名称 包装 产品价格
R0091S RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 12次
R0091M RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 50次
R0091L RNAeasy™血液RNA抽提试剂盒(离心柱式) 200次