产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
D7501-1ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型) | 1ml | 152.00元 |
D7501-5ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型) | 5ml | 636.00元 |
D7501-25ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型) | 25ml | 2669.00元 |
碧云天的BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型),即BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, UDG),是一种用于实时荧光定量PCR,即qPCR (Quantitative PCR)或real-time PCR的新型高品质防污染(Carryover prevention)预混液,主要用于cDNA和基因组DNA等的特异性超高灵敏度定量检测。本产品含有优化比例的高品质UDG酶和dUTP,可有效消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题造成的假阳性或CT值偏低。SYBR Green法一般也称染料法,所以本方法也常称作防污染型染料法。
UDG (Uracil-DNA Glycosylase),也称UNG (Uracil-N-glycosylase),可催化含尿嘧啶的DNA链中的尿嘧啶(dU)碱基和脱氧核糖之间的N-糖苷键发生水解,从而释放游离尿嘧啶,主要应用于消除PCR扩增过程中带来的产物污染问题。其防止污染的原理为:在PCR反应中加入适量的dUTP,以dUTP替代dTTP掺入DNA中,形成含dU碱基的PCR扩增产物;后续进行PCR反应时,使用UDG酶选择性切割可能被污染而带入的之前PCR扩增产生的含有dU的单链或双链DNA,从而避免之前的PCR扩增产物可能的污染对于本次PCR扩增带来的负面影响。
BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型)使用SYBR Green I作为染料。SYBR Green I是一种结合于双链DNA (double-strand DNA, dsDNA)双螺旋小沟区域的绿色荧光染料。SYBR Green I在游离状态下的荧光比较微弱,一旦与双链DNA结合后,其荧光会大大增强。这样通过检测荧光强弱就可以定量检测PCR过程中扩增产生的双链DNA的数量。
本产品使用的BeyoFast™ Taq DNA Polymerase是一种与抗体结合的高品质热启动酶,能够实现便捷高效的热启动。BeyoFast™ Taq DNA Polymerase中的Taq酶与抗Taq酶的单克隆抗体相互结合,从而抑制了Taq酶的DNA聚合酶活性,这样可以有效避免在低温条件下由引物和模板DNA非特异性退火或引物二聚体引起的非特异性扩增。在PCR反应的预变性步骤中抗体会被加热失活,这样可以确保仅在预变性后才会把Taq酶的活性释放出来,预变性之前不会发生DNA聚合反应,从而大大提高了PCR反应的特异性、灵敏度和定量检测的准确性。
本产品包含了BeyoFast™ Taq DNA Polymerase、UDG酶、PCR Buffer、dNTPs、dUTP、SYBR Green I荧光染料、稳定剂和镁离子等所有的通用组分,使操作更简单、使用更便捷。用户只需自备引物、样品DNA和去离子水即可。
本产品不含ROX,适用于无需ROX作为校正染料的荧光定量PCR仪。ROX的作用是用于校正与PCR无关的荧光波动,从而最大限度减少孔间差异。这种差异可能由多种因素引起,如移液误差及样品蒸发等。不同的荧光定量PCR仪对ROX的要求不同,请根据实际所用仪器选择含高浓度ROX (High ROX)、低浓度ROX (Low ROX)或不含ROX的BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型)。通常含高浓度ROX的BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX, 防污染型)也可以用于不需要ROX或需要低浓度ROX的荧光定量PCR仪。常用仪器所需ROX类型请参考如下表格。
添加ROX类型 | 适用PCR仪 |
不需添加 | Bio-Rad: CFX384, CFX96, MiniOpticon, iCycler IQ, MyiQ and iQ5; Eppendorf: Mastercycler ep realplex and realplex2 s; Qiagen/Corbett Rotor-Gene: 6000; Roche: LightCycler 480; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR |
Low ROX | ABI: 7500(Fast), ViiA 7, QuantStudio 6 and 7 Flex Systems; Stratagene: Mx3000P, Mx3005P and Mx4000; Qiagen/Corbett Rotor-Gene: 3000; Bio-Rad/MJ: Chromo4, Opticon 2 and Opticon |
High ROX | ABI GeneAmp 5700; ABI PRISM 7000, 7700; ABI 7300, 7900HT(Fast); ABI StepOne(Plus) |
本产品如果用于常规的96孔板qPCR检测(建议反应体系为20µl),每毫升本产品可以进行100次检测;如果用于常规的384孔板qPCR检测(建议反应体系为10µl),每毫升本产品可以进行200次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7501-1ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型) | 1ml |
D7501-5ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型) | 1ml×5 |
D7501-25ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型) | 1ml×25 |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC避光保存,一年有效;4ºC避光保存,一个月内有效。尽量避免反复冻融。
注意事项:使用前需确保整管试剂完全融化,上下颠倒轻轻混匀后使用。混匀过程中尽量避免产生气泡。
注意引物退火温度,当退火温度<60ºC时,推荐使用三步法PCR扩增。
本产品中含有SYBR Green I荧光染料,保存本产品或设置PCR反应时应避免强光照射,以尽量避免荧光淬灭问题。
对于超过350bp或者高GC含量的扩增片段,建议增加延伸时间至60秒或者采用三步法以提高扩增效率。
经测试,本产品反复冻融10次对使用效果无显著影响。但仍需尽量避免反复冻融本产品,反复冻融可能使产品性能下降。
qPCR检测是超高灵敏度的检测,尽管本产品有很好的防污染效果,PCR反应设置区域还是需尽量避免各种可能的待扩增产物的污染。PCR产物宜密封后丢弃,以避免超高浓度的PCR产物污染实验环境。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Reagent | Volume for One PCR Reaction (20μl) |
BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型) | 10µl |
Forward and Reverse Primer Mix (3μM each) | 2µl |
Template DNA | 2µl |
RNase-Free Water | 6µl |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
D7260-1/5/25ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X) | 1/5/25ml |
D7262-1/5/25ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, Low ROX) | 1/5/25ml |
D7265-1/5/25ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX) | 1/5/25ml |
D7268S/M | BeyoFast™ SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit | 100/500次 |
D7271-1/5/25ml | BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X) | 1/5/25ml |
D7272-1/5/25ml | BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, Low ROX) | 1/5/25ml |
D7273-1/5/25ml | BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, High ROX) | 1/5/25ml |
D7277S/M | BeyoFast™ Probe One-Step qRT-PCR Kit | 100/500次 |
D7501-1/5/25ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, 防污染型) | 1/5/25ml |
D7503-1/5/25ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, Low ROX, 防污染型) | 1/5/25ml |
D7507-1/5/25ml | BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX, 防污染型) | 1/5/25ml |
D7509S/M | BeyoFast™ SYBR Green One-Step qRT-PCR Kit (防污染型) | 100/500次 |
D7512-1/5/25ml | BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, 防污染型) | 1/5/25ml |
D7515-1/5/25ml | BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, Low ROX, 防污染型) | 1/5/25ml |
D7518-1/5/25ml | BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, High ROX, 防污染型) | 1/5/25ml |
D7523S/M/L | BeyoFast™ Multiplex Probe qPCR Mix (2X, 防污染型) | 100/500/2500次 |
D7528S/M | BeyoFast™ Probe One-Step qRT-PCR Kit (防污染型) | 100/500次 |
FASA011 -1pc | BeyoGold™封板膜刮板 | 1个/袋 |
FSF002 | 荧光定量PCR用封板膜(ABI分装) | 20片/包装 |
FSF035 -100pcs | BeyoGold™荧光定量PCR用封板膜(压敏型) | 100片/包装 |
FSF039-20pcs | BeyoGold™荧光定量PCR用封板膜(压敏型, 进口分装) | 20片/包装 |
FSF039-100pcs | BeyoGold™荧光定量PCR用封板膜(压敏型, 进口分装) | 100片/包装 |
FTUB325-1box | BeyoGold™ qPCR八联排管(0.2ml, 平盖, 透明) | 125排/盒 |
FTUB325-10bxs | BeyoGold™ qPCR八联排管(0.2ml, 平盖, 透明) | 125排/盒, 10盒/箱 |
FTUB333 | 荧光定量PCR用96孔板(ABI原装) | 20个/包装 |
FTUB384 | 荧光定量PCR用384孔板(ABI分装) | 20个/包装 |
FTUB335 -1box | BeyoGold™荧光定量PCR用96孔板(0.2ml, 无裙边, 透明) | 10个/盒 |
FTUB335-5bxs | BeyoGold™荧光定量PCR用96孔板(0.2ml, 无裙边, 透明) | 10个/盒, 5盒/箱 |
FTUB337-1box | BeyoGold™荧光定量PCR用96孔板(0.2ml, 半裙边, 透明) | 10个/盒 |
FTUB337-5bxs | BeyoGold™荧光定量PCR用96孔板(0.2ml, 半裙边, 透明) | 10个/盒, 5盒/箱 |