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PDPK1基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液
产品编号: L01769
产品包装:500µl
价格: ¥ 1258.00
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
L01765 PDPK1基因敲除质粒 5µg 999.00元
L01766 PDPK1基因敲除慢病毒 10^8 TU 6999.00元
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L01769 PDPK1基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液 500µl 1258.00元

PDPK1 Knockout HEK293T Trizol Lysate (PDPK1基因敲除HEK293T细胞Trizol裂解液)是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因,并实现了目的基因CRISPR敲除的多克隆HEK293T细胞的Trizol裂解液。该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。本产品可用于该目的基因敲除后其信号通路相关RNA表达的研究。

本Trizol裂解液源于可同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因的慢病毒感染HEK293T细胞并经过puromycin筛选后获得的多克隆HEK293T细胞。制备该细胞的相应慢病毒的基因序列的关键图谱信息请参考图1。

图1. 可同时表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的慢病毒其基因序列的关键图谱信息。

该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。

由于本细胞是通过CRISPR/Cas9技术获得的多克隆细胞,基于CRISPR/Cas9技术的特点,理论上平均有2/3的细胞发生移码突变而导致了目的基因的敲除,平均有1/3的细胞并未发生移码突变。很多情况下有约2/3的细胞发生目的基因的敲除,已经足以进行很多的目的基因的生物学功能的研究了。如果希望获得100%基因敲除的细胞,可以自行使用本产品筛选单克隆细胞,或者委托碧云天进行单克隆细胞株的筛选服务。

本Trizol裂解液用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照细胞Trizol裂解液Control Knockout HEK293T Trizol Lysate (L00031)或靶向GFP的对照Trizol裂解液GFP Knockout HEK293T Trizol Lysate (L00033)

碧云天同时提供基于CRISPR/Cas9技术的PDPK1基因敲除的质粒(L01765 pLenti-PDPK1-sgRNA)慢病毒(L01766 PDPK1 Knockout Lentivirus)HEK293T细胞(L01767 PDPK1 Knockout HEK293T Cells)HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液(L01768 PDPK1 Knockout HEK293T RIPA Lysate)HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液(L01769 PDPK1 Knockout HEK293T Trizol Lysate)等产品,具体请在碧云天网站查询或在本产品网页点击相应产品。

PDPK1基因的基本信息如下:

Species Gene Symbol Gene ID GenBank Accession Transcript
Human PDPK1 5170 BC006339 NM_001261816

 

About the gene
Official Symbol PDPK1
Previous Symbol -
Official Full Name 3-phosphoinositide dependent protein kinase 1
Synonyms PDK1
Location 16p13.3
Gene Type protein-coding gene
Uniprot ID O15530
Pathway/Library Cancer Target Genes Library; Kinases Library
Gene Summary Serine/threonine kinase which acts as a master kinase, phosphorylating and activating a subgroup of the AGC family of protein kinases. Its targets include: protein kinase B (PKB/AKT1, PKB/AKT2, PKB/AKT3), p70 ribosomal protein S6 kinase (RPS6KB1), p90 ribosomal protein S6 kinase (RPS6KA1, RPS6KA2 and RPS6KA3), cyclic AMP-dependent protein kinase (PRKACA), protein kinase C (PRKCD and PRKCZ), serum and glucocorticoid-inducible kinase (SGK1, SGK2 and SGK3), p21-activated kinase-1 (PAK1), protein kinase PKN (PKN1 and PKN2). Plays a central role in the transduction of signals from insulin by providing the activating phosphorylation to PKB/AKT1, thus propagating the signal to downstream targets controlling cell proliferation and survival, as well as glucose and amino acid uptake and storage. Negatively regulates the TGF-beta-induced signaling by: modulating the association of SMAD3 and SMAD7 with TGF-beta receptor, phosphorylating SMAD2, SMAD3, SMAD4 and SMAD7, preventing the nuclear translocation of SMAD3 and SMAD4 and the translocation of SMAD7 from the nucleus to the cytoplasm in response to TGF-beta. Activates PPARG transcriptional activity and promotes adipocyte differentiation. Activates the NF-kappa-B pathway via phosphorylation of IKKB. The tyrosine phosphorylated form is crucial for the regulation of focal adhesions by angiotensin II. Controls proliferation, survival, and growth of developing pancreatic cells. Participates in the regulation of Ca(2+) entry and Ca(2+)-activated K(+) channels of mast cells. Essential for the motility of vascular endothelial cells (ECs) and is involved in the regulation of their chemotaxis. Plays a critical role in cardiac homeostasis by serving as a dual effector for cell survival and beta-adrenergic response. Plays an important role during thymocyte development by regulating the expression of key nutrient receptors on the surface of pre-T cells and mediating Notch-induced cell growth and proliferative responses. Provides negative feedback inhibition to toll-like receptor-mediated NF-kappa-B activation in macrophages. Isoform 3 is catalytically inactive. PDPK1_HUMAN,O15530
包装清单:
产品编号 产品名称 包装
L01769 PDPK1 Knockout HEK293T Trizol Lysate 500µl
说明书 1份
保存条件:

-20℃保存,至少6个月有效;-80℃保存,至少一年有效。

注意事项:

碧云天拥有sgRNA序列的知识产权,如果需要sgRNA序列,请在订购后发送邮件向info@beyotime.com索取。sgRNA序列信息与本产品,未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时,应注明来源。

对于非目录产品的CRISPR基因敲除细胞Trizol裂解液的定制,可联系碧云天技术服务service@beyotime.com

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1. 本细胞Trizol裂解液中含有不少于1×106个细胞。
2. 按照碧云天的Trizol (总RNA抽提试剂) (R0016)中的使用说明进行RNA的抽提:https://www.beyotime.com/product/R0016.htm;或按照Invitrogen™的TRIzol™ Reagent的使用说明进行RNA的抽提,后续可以用于反转录、qRT-PCR、NGS等各种常见用途。
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产品编号 产品名称 包装
L00031 Control Knockout HEK293T Trizol Lysate 500µl
L00033 GFP Knockout HEK293T Trizol Lysate 500µl
D7166 BeyoRT™ cDNA第一链合成试剂盒(RNase H-) 10次
D7168 BeyoRT™ II cDNA第一链合成试剂盒(RNase H-) 20/100/500次
D7170 BeyoRT™ II cDNA合成试剂盒(with gDNA Eraser) 20/100/500次
D7178 BeyoRT™ III cDNA第一链合成试剂盒 20/100/500次
D7180 BeyoRT™ III cDNA合成试剂盒 (with gDNA EZeraser) 20/100/500次
D7182 BeyoRT™ III cDNA第一链合成预混液(5X) 20/100/500次
D7185 BeyoRT™ III cDNA合成预混液(5X)(with gDNA EZeraser) 20/100/500次
D7260 BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X) 1/5/25ml
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D7265 BeyoFast™ SYBR Green qPCR Mix (2X, High ROX) 1/5/25ml
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D7272 BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, Low ROX) 1/5/25ml
D7273 BeyoFast™ Probe qPCR Mix (2X, High ROX) 1/5/25ml
D7277 BeyoFast™ Probe One-Step qRT-PCR Kit 100/500次
R0011 Beyozol (总RNA抽提试剂) 100ml
R0016 Trizol (总RNA抽提试剂) 100ml
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