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多肽与蛋白> 蛋白检测> ELISA
产品编号: P0323S
产品包装:20ml
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价格: ¥ 159.00
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产品编号 产品名称 产品包装 产品价格
P0323S 单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒) 20ml 159.00元
P0323M 单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒) 100ml 518.00元
P0323L 单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒) 500ml 1598.00元

碧云天的单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒) (All-in-one Alkaline Phosphatase Chromogen Solution with Stabilizing Pellets),也称单组分碱性磷酸酶底物显色液(含稳定颗粒) (Alkaline Phosphatase Substrate Solution, One-component Formulation with Stabilizing Pellets)、pNPP显色液(pNPP Chromogen Solution)、One-step pNPP、pNPP Solution或pNPP Substrate Solution,是一种用于快速、便捷地进行用于碱性磷酸酶标记的ELISA等检测的显色底物溶液。

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)也称碱性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1),可以在碱性条件下催化磷酸酯键的水解。常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, CIAP/CIP)被广泛用于二抗等的标记最终用于蛋白和核酸等的检测。

para-nitrophenyl phosphate (pNPP)是一种常用的磷酸酶显色底物,在碱性条件下,可在碱性磷酸酶作用下生成para-nitrophenol (p-nitrophenol)。para-nitrophenol在碱性条件下,呈黄色,可以在400-415nm检测吸光度[1, 2]。使用本产品对不同浓度碱性磷酸酶(AP)标记二抗的检测效果参见图1。

图1.碧云天单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒) (P0323)对不同浓度碱性磷酸酶标记抗体(AP-labeled Antibody)的检测效果图。将碱性磷酸酯酶标记山羊抗兔IgG (H+L) (A0239)稀释至图中所示浓度,各取20µl,加入100µl本产品后孵育,分别在20分钟和30分钟时检测405nm处的吸光度(A405)。从图中结果可知,AP标记二抗浓度在0-0.06%范围内呈现良好的线性关系。实测数据会因试剂、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

本产品为单组分、即用型显色液,在平衡至反应温度后无须配制并可立即使用。常见的基于pNPP的显色底物需要将pNPP片剂或固体粉末溶于特定缓冲液并稀释至所需浓度使用;或是基于双溶液体系,需在临使用前按比例进行混合,现配现用。本产品为即用型单一溶液,简化了操作步骤,降低了操作误差,可以使检测结果更加稳定可靠。

本产品的显色反应可以采用传统方法(例如加入100µl 0.1M的NaOH溶液)进行终止。

对于细胞或组织样品的裂解液、血清、血浆、尿液等样品中的碱性磷酸酶活性,推荐使用碧云天的碱性磷酸酶检测试剂盒(P0321)或碱性磷酸酶检测试剂盒(荧光法) (P0322)进行检测。

ELISA等类似检测时,按照每孔使用100µl,本产品小包装、中包装和大包装分别可用于200个、1000个和5000个样品的检测。

包装清单:
产品编号 产品名称 包装
P0323S 单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒) 20ml
P0323M 单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒) 100ml
P0323L 单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒) 500ml
说明书 1份
保存条件:

4ºC避光保存,一年有效。-20ºC可以保存更长时间。

注意事项:

本产品中含有密度较大的稳定颗粒,通常沉淀在容器底部,不会影响显色液的正常取用,吸取显色液时注意适当避开颗粒即可。

本产品不适用于需要沉淀反应产物的膜或免疫组化显色用途。如需进行此类检测,推荐使用碧云天BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒(C3206)。

本产品为无色至微黄色溶液,如果发现溶液颜色变成较深的黄色,应该停止使用。

样品溶液中须避免出现EDTA、氟离子、柠檬酸盐等碱性磷酸酶的抑制剂。

本产品对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明:
1.试剂准备。
将单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒)取出,恢复至室温使用。
2.对于ELSIA等的检测。
a.参考ELISA试剂盒等的实验步骤,在最后一步与碱性磷酸酶标记的抗体等孵育后,用适当洗涤液洗涤3-5次,每次3-5分钟。
b.洗涤完毕后,去除洗涤液,加入100µl本产品。
c.室温避光孵育20-30分钟或更长时间,直至显色至预期深浅。
d.如果不进行终止,可直接测定吸光度。或加入100µl 0.1M的NaOH溶液终止反应,随后在相应波长测定吸光度。
e.在405nm测定吸光度。如果不能测定405nm,也可以在400-415nm范围内检测吸光度。反应终止后的溶液,如果不能立即测定,可以在数小时内完成测定,所显现的黄色在数小时内稳定。
参考文献:
1.Bessey OA, Lowry OH, Brock MJ. J Biol Chem. 1946. 164:321-9.
2.Tietz NW, Burtis CA, Duncan P, Ervin K, Petitclerc CJ, et al. Clin Chem. 1983. 29(5):751-61.
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产品编号 产品名称 包装
A0239 碱性磷酸酯酶标记山羊抗兔IgG (H+L) 0.5ml
A0258 碱性磷酸酯酶标记山羊抗小鼠IgG (H+L) 0.5ml
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C3206 BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒 共100ml
D7027 BeyoAP Alkaline Phosphatase 200U
P0321 碱性磷酸酶检测试剂盒 100/500次
P0322 碱性磷酸酶检测试剂盒(荧光法) 100/500次
P0323 单组分碱性磷酸酶显色液(含稳定颗粒) 20/100/500ml
P0606 SABC-AP Kit (IHC, ICC, Blotting & ELISA) 1000次
ST1042 4-硝基苯磷酸二钠盐六水合物(≥99%, Reagent grade) 1/5/25g
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