产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
R7086S | RNase III (dsRNA-specific) | 200U | 398.00元 |
R7086M | RNase III (dsRNA-specific) | 1KU | 1598.00元 |
R7086L | RNase III (dsRNA-specific) | 5KU | 6298.00元 |
碧云天生产的RNase III,即核糖核酸酶III,是由碧云天自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的一种来源于大肠杆菌的双链RNA (Double-strand RNA, dsRNA)特异性的核糖核酸酶。在锰离子(Mn2+)存在的反应缓冲液中,RNase III可特异性地将较长的双链RNA (dsRNA)切割成长度约为18-25bp的3'羟基末端带有2-3个突出碱基的干扰RNA (siRNA) [1,2],该产物与Dicer酶切产生的底物类似,具有用于哺乳动物细胞的RNA干扰(RNA interference)、基因沉默、靶标确认等多种用途[3]。RNase III不能水解DNA或单链RNA。
碧云天生产的RNase III用于切割500bp双链RNA生成siRNA的效果请参考图1。
图1. 碧云天生产的RNase III (R7086)切割500bp双链RNA生成siRNA的效果图。使用本产品或N公司(Competitor)的RNase III,在10µl反应体系(50mM Tris-HCl, 50mM NaCl, 1mM DTT, 20µM MnCl2 (pH7.5 @25ºC))中加入1µg 500bp的dsRNA,以及图中指定量的本产品或N公司(Competitor)的RNase III,然后用超纯水(ST876)补至10µl,37ºC孵育20分钟进行反应。反应完成后立即加入终浓度为50mM的EDTA以终止反应。取反应后产物10μl加入2μl 6X DNA Loading Buffer (D0071),1%的琼脂糖凝胶电泳,随后在紫外灯下观察实验结果。如图所示,本产品与N公司的RNase III产品相比,对500bp的dsRNA具有类似的酶切效果。dsRNA是使用T7 Quick High Yield RNA Transcription Kit (R7016)将两条含T7启动子的500bp的互补DNA链进行体外转录生成两条互补的500nt单链RNA,随后使用Annealing Buffer for RNA Oligos (5X) (R0051)并按照该产品说明书推荐的程序,把这两条互补的500nt单链RNA进行退火反应得到的产物。实际操作时不同实验条件获得的实验结果会略有差异,图中所示结果仅供参考。
用途:dsRNA的水解酶切;产生siRNA;基因沉默;基因靶标确认 (target validation)。
来源:纯化自携带编码大肠杆菌RNase III基因的E.coli重组菌株。
活性定义: One unit is the amount of enzyme required to digest 1µg of dsRNA to siRNA in 20 minutes at 37ºC in a total reaction volume of 50µl.
纯度:不含除RNase III之外的其它种类的RNA内切酶和外切酶,不含DNase。
酶储存液:10mM Tris-HCl, 500mM NaCl, 1mM DTT, 0.5mM EDTA, 50% Glycerol (pH8.0 @25ºC)。
10X Reaction Buffer: 500mM Tris-HCl, 500mM NaCl, 10mM DTT (pH7.5 @25ºC).
失活或抑制:不能进行热失活;加入反应终止液10X EDTA(终浓度为50mM EDTA)可使RNase III失活。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7086S-1 | RNase III (2U/μl) | 100μl |
R7086S-2 | 10X Reaction Buffer | 0.2ml |
R7086S-3 | 10X EDTA | 0.2ml |
R7086S-4 | 10X MnCl2 | 0.2ml | - | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7086M-1 | RNase III (2U/μl) | 500μl |
R7086M-2 | 10X Reaction Buffer | 1ml |
R7086M-3 | 10X EDTA | 1ml |
R7086M-4 | 10X MnCl2 | 1ml | - | 说明书 | 1份 |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7086L-1 | RNase III (2U/μl) | 2.5ml |
R7086L-2 | 10X Reaction Buffer | 5ml |
R7086L-3 | 10X EDTA | 5ml |
R7086L-4 | 10X MnCl2 | 5ml | - | 说明书 | 1份 |
-20ºC保存,两年有效。
注意事项:RNase III不能进行热失活,否则会降低siRNA的产率;可通过加入终浓度为50mM的EDTA以终止反应。
RNA极易降解,在整个操作过程中应尽可能避免环境中RNase的影响。
RNase III使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Reagent | Volume | Volume | Final Concentration |
dsRNA | xμl (2μg) | xμl (10μg) | 100ng/µl |
10X Reaction Buffer | 2μl | 10μl | 1X |
10X MnCl2 | 2μl | 10μl | 1X |
Nuclease-Free Water | (14-x)μl | (70-x)μl | - |
RNase III | 2μl | 10μl | 0.2U/µl |
Total Volume | 20μl | 100μl |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
R7086S | RNase III (dsRNA-specific) | 200U |
R7086M | RNase III (dsRNA-specific) | 1KU |
R7086L | RNase III (dsRNA-specific) | 5KU |
R7088S | RNase H | 250U |
R7088M | RNase H | 1000U |
R7088L | RNase H | 5000U |
D7089 | RNase H | 100U |
R7090S | Thermostable RNase H | 250U |
R7090M | Thermostable RNase H | 1000U |
R7090L | Thermostable RNase H | 5000U |
R7092S | RNase R | 500U |
R7092M | RNase R | 2KU |
R7092L | RNase R | 10KU |
R7096S | RNase T1 | 100000U |
R7096M | RNase T1 | 500000U |
ST576 | RNase A (10mg/ml, DNase free) | 1ml |
ST577 | RNase A (100mg/ml, DNase free) | 0.5ml |
ST578 | RNase A (10mg/ml) | 1ml |
ST579 | RNase A (100mg/ml) | 0.5ml |
R0102-2kU | RNase Inhibitor | 2000U |
R0102-10kU | RNase Inhibitor | 10000U |
R0102-50kU | RNase Inhibitor | 50000U |
R0123 | RNase and DNase Away | 250ml |
R0125 | RNase, DNase and DNA Away | 250ml |
R0127 | RNase, DNase, RNA and DNA Away | 250ml |
R7016S | T7 Quick High Yield RNA Transcription Kit | 25次 |
R7016M | T7 Quick High Yield RNA Transcription Kit | 100次 |
R7018S | T7 High Yield RNA Transcription Kit | 25次 |
R7018M | T7 High Yield RNA Transcription Kit | 100次 |