产品编号 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
S0064S | 超氧阴离子活性氧检测试剂盒(DHE) | 100-1000次 | 698.00元 |
碧云天研发生产的超氧阴离子活性氧检测试剂盒(DHE) (Reactive Oxygen Species Assay Kit for Superoxide Anion with DHE),简称ROS Assay Kit for Superoxide Anion with DHE,是一种以DHE为荧光探针,快速灵敏地检测细胞内超氧阴离子活性氧的试剂盒。本试剂盒可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测系统进行检测。
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括超氧阴离子(·O2-)、过氧化氢(H2O2)、羟自由基(·OH)等。在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧,同时一些环境因素例如紫外照射、γ射线照射、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。活性氧产生后,可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤,诱发氧化应激(Oxidative stress),继而可能导致肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等[1]。
Dihydroethidium简称DHE,是最常用的检测细胞内超氧化物阴离子水平的荧光探针。分子式为C21H21N3,分子量为315.41。
Dihydroethidium是一种最常用的超氧化物阴离子荧光检测探针。可以直接用于活细胞的标记。Dihydroethidium被活细胞摄入后,可以在细胞内的超氧化物阴离子作用下脱氢,产生Ethidium。Ethidium (例如溴化乙锭)可以和RNA或DNA结合产生红色荧光。当细胞内的超氧化物阴离子水平较高时,产生的Ethidium较多,红色荧光就较强,反之则较弱。这样就可以用dihydroethidium进行超氧化物阴离子水平的检测[2]。
Dihydroethidium本身为蓝色荧光,最大激发波长为370nm,最大发射波长为420nm,脱氢后和RNA或DNA结合产生红色荧光,最大激发波长为300nm,最大发射波长为610nm,实际观察时也可以使用535nm作为激发波长。
本试剂盒同时提供了DHE探针、阳性对照和检测缓冲液,使用更便捷。本试剂盒提供的DHE为1000X储存液,该溶液经过优化,对大多数细胞都适用;超氧阴离子活性氧阳性对照试剂Rosup II可短时间内诱导细胞活性氧生成。同时,本试剂盒提供了Assay Buffer,使用更便捷。使用本试剂盒检测NRK-52E和L-929细胞内超氧阴离子活性氧的效果参考图1、图2。
图1.碧云天超氧阴离子活性氧检测试剂盒(DHE) (S0064)检测NRK-52E (大鼠肾小管上皮细胞)细胞内超氧阴离子活性氧的效果图。正常的NRK-52E细胞中超氧化物阴离子含量很低,使用本试剂盒染色后细胞核内无明显红色荧光(图A);使用超氧阴离子活性氧阳性对照试剂Rosup II处理细胞60分钟后,使用本试剂盒染色后细胞核内红色荧光显著增强(图B)。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异,本图仅供参考。
图2.碧云天超氧阴离子活性氧检测试剂盒(DHE) (S0064)检测L-929 (小鼠成纤维细胞)细胞内超氧阴离子活性氧的效果图。正常的L-929细胞内超氧化物阴离子含量很低;使用超氧阴离子活性氧阳性对照试剂Rosup II处理细胞60分钟后,使用本试剂盒进行荧光染色后经流式细胞仪(图A)或酶标仪(图B)检测荧光强度显著升高。实际检测效果会因实验条件、检测仪器的不同而存在差异,本图仅供参考。
本试剂盒小包装,6孔板每孔检测体系的体积为1ml时,可以检测100次;96孔板每孔检测体系为100μl时,可以检测1000次。如果用于流式细胞仪,每个样品检测体系体积为0.5ml时,可以进行200次检测。
包装清单:产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0064S-1 | DHE (1000X) | 100μl |
S0064S-2 | Rosup II (1000X) | 50μl |
S0064S-3 | Assay Buffer | 200ml |
— | 说明书 | 1份 |
-20ºC避光保存,一年有效。其中DHE (1000X)须避光保存。
注意事项:DHE (1000X)和Rosup II (1000X)第一次使用时请分装后-20ºC保存,避免反复冻融。
DHE易在空气中氧化,请尽量避免暴露于空气中。
DHE脱氢后产生一定毒性的Ethidium,请注意防护。
荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
Assay Buffer经过过滤除菌处理,在使用时须注意避免微生物污染,否则很可能严重影响染色效果。如果Assay Buffer发生浑浊等明显的微生物污染,就不能继续使用。
荧光酶标仪检测时须使用适合荧光检测的黑板或白板,推荐使用碧云天BeyoGold™全黑96孔细胞培养板(平底带盖, 独立包装) (FCP966)或BeyoGold™黑色透明底96孔细胞培养板(平底带盖, 独立包装) (FCP965)。
BSA和酚红(Phenol red)对DHE的检测有干扰,需避免。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
Samples | 1 | 10 | 100 |
DHE (1000X) | 0.1μl | 1μl | 10μl |
Assay Buffer | 99.9μl | 999μl | 9.99ml |
DHE Staining Solution | 100μl | 1ml | 10ml |
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
S0033 | 活性氧检测试剂盒 | >100/>500次 |
S0038 | 过氧化氢检测试剂盒 | 150次 |
S0060 | 超氧化物检测试剂盒 | 100次 |
S0061 | 线粒体超氧化物检测试剂盒(MitoSOX Red) | 20-200/100-1000次 |
S0063 | Dihydroethidium (超氧化物阴离子荧光探针) | 5mg |
S0064S | 超氧阴离子活性氧检测试剂盒(DHE) | 100-1000次 |
S0067-100μg | SOSG (单线态氧绿色荧光探针) | 100μg |
S0068S | 单线态氧检测试剂盒(SOSG) | 30-300次 |
S0131 | 脂质氧化(MDA)检测试剂盒 | 100/500次 |
S0043 | 脂质过氧化检测试剂盒(BODIPY 581/591 C11) | 100-1000/500-5000次 |